Betriebsschritte für das Rindersekriten-Immunglobulin Aelisa-Testkit:

1. Verdünnung und Probenahme von Standardprodukten: 10 Löcher auf der Platte des Enzym-Standardpakets, 100 μl Standardprodukte in das erste und zweite Loch, dann 50 μl Standardverdünnung in das erste und zweite Loch, vermischen; Dann nehmen Sie jeweils 100 µl aus einem Loch und dem zweiten Loch in das dritte und vierte Loch und fügen Sie 50 µl Standardverdünnung in das dritte und vierte Loch hinzu und mischen; Dann nehmen Sie im dritten und vierten Loch jeweils 50 µl ab, dann nehmen Sie jeweils 50 µl in das siebte und achte Loch, dann in das siebte und achte Loch jeweils 50 µl Standardverdünnung hinzufügen, mischen Sie dann aus dem siebten und achten Loch in das fünfte und sechste Loch, dann in das fünfte und sechste Loch jeweils 50 µl Standardverdünnung hinzufügen, mischen; Nach dem Vermischen werden jeweils 50 µl aus dem fünften und sechsten Loch in das neunte und zehnte Loch hinzugefügt, dann im neunten und zehnten Loch jeweils 50 µl Standardverdünnung hinzugefügt und nach dem Vermischen werden jeweils 50 µl aus dem neunten und zehnten Loch entfernt. (Nach der Verdünnung beträgt die Probenmenge für jedes Loch 50 μl mit Konzentrationen von 180 ng / L, 120 ng / L, 60 ng / L, 30 ng / und 15 ng / L).

2. Probenahme: Setzen Sie jeweils ein leeres Loch (das leere Kontrollloch enthält keine Probe und ein Enzym-Markierungsmittel, die übrigen Schritte sind dieselben) und das Probenloch. Zuerst 40 µl Probenverdünnung in die Probenlöcher auf der Enzympaketplatte und anschließend 10 µl Probenverdünnung (5-fache Endverdünnung). Die Probe wird auf den Boden des Enzym-Markierungslochs gelegt, versuchen Sie, die Lochwande nicht zu berühren und schütteln Sie sanft.

3. Temperaturzucht: 37 ° C Temperaturzucht für 30 Minuten mit einer Dichtplatte.

4. Zuordnung: Verdünnen Sie die 30-mal (20-mal 48T) konzentrierte Waschflüssigkeit nach 30-mal (20-mal 48T) mit destilliertem Wasser.

5. Waschen: Vorsichtig entfernen Sie die Dichtungsfilm, entfernen Sie die Flüssigkeit, trocknen Sie, füllen Sie jedes Loch mit Waschflüssigkeit, lassen Sie es nach 30 Sekunden entfernen, so wiederholen Sie es 5 Mal, trocknen Sie.

6. Addition von Enzymen: 50 μl Enzym-Label-Reagenz pro Loch hinzugefügt, mit Ausnahme von leeren Lochen.

7. Wärmezucht: Betrieb und 3.

8. Waschen: Betrieb mit 5.

9. Farbdesignation: Fügen Sie zuerst das Farbdesignant A50 μl zu jedem Loch hinzu, fügen Sie das Farbdesignant B50 μl hinzu, schütteln Sie leicht und mischen Sie bei 37 ° C für 15 Minuten.

10. Beenden: 50 μl Endflüssigkeit pro Loch hinzufügen, um die Reaktion zu beenden (zu diesem Zeitpunkt wird blau vertikal gelb).

Messung: Messung der Absorption (OD-Wert) der einzelnen Löcher mit leerer Klimaanlage mit Null und einer Wellenlänge von 450 nm. Die Messung sollte 15 Minuten nach dem Zusatz der Termination erfolgen.