Qiagen QIAprep Spin Miniprep Kit 27106

Hinweis:
1. Die Kiste aus der Kühlumgebung zu entfernen, sollte nach Raumtemperatur-Gleichgewicht 15-30 Minuten verwendet werden können, Enzym-Markierungspaket nach dem Öffnen der Platte, wenn es nicht beendet ist, sollte die Platte in einem versiegelten Beutel gelagert werden.
2. Konzentrierte Waschflüssigkeit kann kristallisiert werden, kann bei der Verdünnung im Wasserbad erhitzt werden, während das Waschen das Ergebnis nicht beeinflusst.
Jeder Schritt der Probenahme sollte ein Probenahmer verwenden und seine Genauigkeit regelmäßig korrigieren, um Testfehler zu vermeiden. Eine Probenzeit ist am besten innerhalb von 5 Minuten zu kontrollieren, wenn die Probenanzahl groß ist, wird die Verwendung von Riflen empfohlen.
4. Bitte machen Sie die Standardkurve gleichzeitig bei jeder Messung, am besten komponierte Löcher. Wenn der Gehalt der zu messenden Substanz in der Probe zu hoch ist (der OD-Wert der Probe ist größer als der OD-Wert der Standardbohrung), verdünnen Sie die Probe zuerst um ein bestimmtes Vielfaches (n-mal) und messen Sie es anschließend mit dem Gesamtverdünnungsvervielfachen (×n×5) bei der Berechnung.
5. Dichtfilm beschränkt sich auf eine einmalige Verwendung, um Kreuzverschmutzung zu vermeiden.
6. Untergrund bitte vor Licht aufbewahren.
7. streng in Übereinstimmung mit der Bedienungsanleitung durchgeführt, müssen die Testergebnisse anhand der enzymatischen Messwerte bestimmt werden.
8. Alle Proben, Waschflüssigkeiten und Abfälle müssen mit Infektionsstoffen behandelt werden.
Verschiedene Bestandteile dieses Reagents dürfen nicht gemischt werden.
10. Bei Abweichung von der englischen Anleitung gilt die englische Anleitung.

Qiagen QIAprep Spin Miniprep Kit 27106

Betriebsschritte
1. Verdünnung und Probenahme von Standardprodukten: 10 Löcher auf der Platte des Enzym-Standardpakets, jeweils 100 μl Standardprodukte in das zweite Loch, dann 50 μl Standardverdünnung in das zweite Loch und Mischung; Dann nehmen Sie aus dem Loch und dem zweiten Loch jeweils 100 μl in das dritte und vierte Loch, dann geben Sie im dritten und vierten Loch jeweils 50 μl Standardverdünnung hinzu und mischen; Dann nehmen Sie im dritten und vierten Loch jeweils 50 µl ab, dann nehmen Sie jeweils 50 µl in das fünfte und sechste Loch, dann in das fünfte und sechste Loch jeweils 50 µl Standardverdünnung hinzufügen und vermischen; Nach dem Vermischen nehmen Sie jeweils 50 μl aus dem fünften und sechsten Loch in das siebte und achte Loch, dann in das siebte und achte Loch jeweils 50 μl Standardverdünnung hinzufügen, nach dem Vermischen nehmen Sie jeweils 50 μl aus dem siebten und achten Loch in das neunte und zehnte Loch hinzufügen, dann in das neunte und zehnte Loch jeweils 50 μl Standardverdünnung hinzufügen, nach dem Vermischen nehmen Sie jeweils 50 μl aus dem neunten und zehnten Loch weg. (Nach der Verdünnung beträgt die Probenmenge für jedes Loch 50 μl mit Konzentrationen von 6 pmol/L, 4 pmol/L, 2 pmol/L, 1 pmol/L und 0,5 pmol/L).
2. Probenaufnahme: Setzen Sie jeweils ein leeres Loch (das leere Kontrollloch enthält keine Probe und ein Enzym-Markierungsmittel, die übrigen Schritte sind dieselben), das Probenloch wird getestet. Zuerst 40 µl Probenverdünnung in die Probenlöcher auf der Enzympaketplatte und anschließend 10 µl Probenverdünnung (5-fache Endverdünnung). Die Probe wird auf den Boden des Enzym-Markierungslochs gelegt, versuchen Sie, die Lochwande nicht zu berühren und schütteln Sie sanft.
3. Temperaturzucht: 37 ° C Temperaturzucht für 30 Minuten mit einer Dichtplatte.
4. Zuordnung: Verdünnen Sie die 30-mal (20-mal 48T) konzentrierte Waschflüssigkeit nach 30-mal (20-mal 48T) mit destilliertem Wasser.
5. Waschen: Vorsichtig entfernen Sie die Dichtungsfilm, entfernen Sie die Flüssigkeit, trocknen Sie, füllen Sie jedes Loch mit Waschflüssigkeit, lassen Sie es nach 30 Sekunden entfernen, so wiederholen Sie es 5 Mal und trocknen Sie.
6. Addition von Enzymen: 50 μl Enzym-Label-Reagenz pro Loch hinzufügen, mit Ausnahme von leeren Lochen.
7. Wärme: Betrieb und 3.
8. Waschen: Betrieb mit 5.
9. Anzeige der Farbe: Fügen Sie zuerst das Anzeigemittel A50 μl zu jedem Loch hinzu, fügen Sie das Anzeigemittel B50 μl hinzu, mischen Sie leicht und schütteln Sie bei 37 ° C für 15 Minuten.
10. Beenden: 50 μl Endflüssigkeit pro Loch hinzufügen, um die Reaktion zu beenden (zu diesem Zeitpunkt wird blau vertikal gelb).
Messung: Messung der Absorption (OD-Wert) der einzelnen Löcher mit leerer Klimaanlage Null und einer Wellenlänge von 450 nm. Die Messung sollte innerhalb von 15 Minuten nach dem Zusatz des Terminals durchgeführt werden.

Probenbehandlung und Anforderungen:
1. Serum: Blut bei Raumtemperatur gerinnt natürlich 10-20 Minuten und zentrifiziert etwa 20 Minuten (2000-3000 U / min). Sorgfällig sammeln Sie die Oberklärung, wenn es während der Aufbewahrung zu Niederschlag kommt, sollte erneut zentrifiziert werden.
2. Plasma: EDTA oder Natriumcitrat als Antikoagulant nach den Anforderungen der Probe ausgewählt werden, nach 10-20 Minuten gemischt und ungefähr 20 Minuten (2000-3000 U / min) zentrifugiert werden. Sorgfällig sammeln Sie die Oberklärung, wenn es während der Aufbewahrung eine Niederlage gibt, sollte sie erneut zentrifiziert werden.
3. Urin: Sammeln Sie mit sterilen Röhren und zentrifizieren Sie es für etwa 20 Minuten (2000-3000 U / min). Sorgfällig sammeln Sie die Oberfläche, wenn sich während der Aufbewahrung eine Niederlage bildet, sollte sie erneut zentrifiziert werden. Brust-Bauch-Wasser, Gehirn-Rücken-Flüssigkeit Referenz durchgeführt.
4. Zellkultur: bei der Erkennung der sekretiven Komponenten mit sterilen Röhren gesammelt. Zentrifugieren Sie etwa 20 Minuten (2000-3000 U / min). Aufmerksam sammeln. Die Zellsuspension wurde mit PBS (PH7.2-7.4) verdünnt und die Zellkonzentration erreichte etwa 1 Million / ml. Durch wiederholtes Gefrierschmelzen, so dass die Zellen zerstört und die innerzelligen Bestandteile freigelassen werden. Zentrifugieren Sie etwa 20 Minuten (2000-3000 U / min). Aufmerksam sammeln. Wenn während der Aufbewahrung eine Niederlage entsteht, sollte sie erneut zentrifiziert werden.
5. Gewebeprobe: Nach dem Schneiden der Probe wird das Gewicht gewogen. Hinzufügen einer bestimmten Menge PBS, PH7.4. Schnell mit flüssigem Stickstoff gefriert aufbewahren. Die Probe bleibt nach dem Schmelzen bei einer Temperatur von 2-8 ° C erhalten. Fügen Sie eine gewisse Menge PBS (PH7.4) hinzu, um die Probe manuell oder mit einem Homogenator ausreichend zu homogenieren. Zentrifugieren Sie etwa 20 Minuten (2000-3000 U / min). Aufmerksam sammeln. Nach der Aufteilung wird eine Kopie getestet, der Rest wird gefroren.
6. Die Extraktion erfolgt so früh wie möglich nach der Probenaufnahme, die Extraktion erfolgt nach der einschlägigen Literatur, die Experimente sollten so schnell wie möglich nach der Extraktion durchgeführt werden. Wenn der Test nicht sofort durchgeführt werden kann, kann die Probe bei -20 ° C gelagert werden, sollte jedoch wiederholtes Gefrierschmelzen vermieden werden.
Proben, die NaN3 enthalten, können nicht nachgewiesen werden, da NaN3 die Aktivität der Moringa Peroxidase (HRP) hemmt.