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Shanghai Yaji Biotechnologie Co., Ltd.
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Bedienungsanleitung für die Oxytoxin A (OTA) Enzym-verbundene Immunanalyse (ELISA) Kit
Datum:2024-12-13Lesen Sie:1

Diese Kit ist ausschließlich zur Forschung bestimmt.

1 Verwendungszweck:
Diese Kit wird verwendetFuttermittel, Fisch, Garnelen und Fleischgewebe (wie Hühnchen, Rindfleisch und Schweinefleisch),Nahrung,Tramycin in Eiern, Honig, Milch, Serum und UrinprobenAOTAQuantitative Rückstandsprüfung

2 Experimentelle Prinzipien
Diese Kit verwendet WettbewerbELISAMethode, die in der Mikroporenplatte Paket vorhanden istTramycinAOTAgekoppeltes Antigen, hinzufügenTramycinAOTAStandardartikel oder Proben, freiTramycinAOTAVorverpackt mit MikroporenTramycinAOTAGekoppelte Antigene konkurrieren miteinanderTramycinAOTAAntikörper-Enzym-Marker, mitTMBSubstrat Anzeige, nach dem Hinzufügen der Endflüssigkeit wird die Farbe von blau zu gelb, mit dem Enzym-Marker in450nmMessung unter Wellenlängen, Absorptionswerte und ProbenTramycinAOTAGehalt im umgekehrten VerhältnisDurch die StandardkurveBerechnen von ProbenMitteTramycinAOTAInhalt.

3 Zusammensetzung des Kits

3.1 Vorverpackt.TramycinAOTAEntfernbare Marker für gekoppelte Antigene:1Block (12Löcher×8Artikel).
3.2TramycinAOTAStandardprodukte:6Flasche (1 mlDie Flaschen enthalten jeweils:0 ppb0.1 ppb,0.3ppb,0.9ppb,2.7ppb,8.1ppb
3.3WiderstandTramycinAOTAAntikörper-Enzymverbindungen:1Flasche (6 ml)。
3.4FarbbildflüssigkeitA1Flasche (6 ml)。
3.5FarbbildflüssigkeitB1Flasche (6 ml)。
3.6Endflüssigkeit:1Flasche (6 ml),2MSchwefelsäure.
3.7Probeverdünnung:1Flasche (10×, 6ml(zur Verdünnung der Probe).
3.8Konzentrierte Waschmittel:1Flasche (220ml(zum Waschen von Platten).
3.9Eine Anleitung.

4 Notwendige und nicht bereitgestellte Materialien
4.1 Gerät
4.1.1Wellenlänge450nmEnzym-Marker.
4.1.2Zerkleinerer.
4.1.3Zylinder.
4.1.4Oszillator.
4.1.5Schleifer.
4.1.6Whatman Nr. 1Oder gleichwertiges Filterpapier.
4.1.7Spuren Pipetten.
4.2 Reagenzien
4.2.1Desionisieren oder destillieren Sie Wasser.
4.2.2Methanol.
5 Speichern
5.1 Die Kits werden in2~8Nicht einfrieren.
5.2 Unverbrauchte Mikroporenplatten sollten verschlossen und trocken aufbewahrt werden
6 Hinweise
6.1 Bitte lesen Sie die Bedienungsanleitung sorgfältig vor der Verwendung des Kits.
6.2 Verwenden Sie keine veralteten Kits.
6.3 Zurücksetzen Sie das Reagenz vor der Verwendung auf Raumtemperatur (25±2Mindestens erwärmen wird empfohlen.2Stunden.
6.4 Standardprodukte enthalten TramycinAOTABei der Verwendung sollte besondere Aufmerksamkeit geschenkt werden, Handschuhe bei der Bedienung zu tragen.
6.5 Die Endflüssigkeit enthält Schwefelsäure, die bei der Verwendung verhindert, dass Haut verbrannt und Kleidung korrodiert wird.
6.6 Verschiedene Standardprodukte und Proben können nicht gemischt werden, sonst können die Testergebnisse beeinflusst werden.
6.7 Reagenzien aus unterschiedlichen Chargennummern dürfen nicht gemischt werden; Verschiedene Standardprodukte und Proben dürfen nicht gemischt werden, sonst können die Ergebnisse beeinflusst werden.
6.8 Beim Verdünnen der Probe muss die Probenverdünnungsflüssigkeit in diesem Kit verwendet werden, sonst wird das Ergebnis beeinflusst.
6.9 Bei der Mischung von Reagenzien sollten Schaumstoffe vermieden werden.
7 Arbeitsflüssigkeitsvorbereitung
7.1 TramycinAOTAStandardlösungen:0ppb,0.1ppb,0.3ppb,0.9ppb,2.7ppb,8.1ppb
7.2 Konzentrierte Waschflüssigkeit: mit destilliertem Wasser drücken1:20(1+19)VerdünnungErsatz

7.3 Probeverdünnung: mit destilliertem Wasser drücken1:10(1+9)Verdünnung Ersatz
7.3 Farbstoff: Zurück zur Vermeidung von direktem Licht
7.4 Reaktions-Endflüssigkeit: Ersatz
8 Probenbehandlungsverfahren(Die Probe im Extraktionsprozess muss strikt nach der Anleitung betrieben werden, sollte während der Extraktion genau verdünnt werden, sonst wird das Ergebnis ungenau sein, die Probe sollte in einem kühlen Lichtschutz und im Kühlraum gelagert werden)
8.110gZerkleinerte Proben, plus20ml 70%Methanol-Lösung
8.2Starke Oszillation3Minute
8.3VerwendenWhatman Nr 1Filterpapierfilter
8.425µlNachdem die Probe verarbeitet wurde, fügen Sie25µlProbeverdünnungim Reaktionsboch (die Probe verdünnt2
9 Enzymfreie Analyseschritte
9.1 Experimente wissen
9.1.1Alle Reagenzien vor Beginn des Experiments vollständig außerhalb der Box auf Raumtemperatur zurücksetzen (25±2(Zeit ca.2Stunden. Zurück auf Raumtemperatur (25±2Danach entfernen Sie die Mikroporen und die überschüssigen Mikroporen werden sofort wieder versiegelt.2~8Trockene Aufbewahrung
Hinweis: Sicherstellen Sie, dass die Rückwärme ausreichend ist, sonst beeinflussen Sie die Genauigkeit und Genauigkeit der Prüfung.
9.1.2Bitte setzen Sie das Reagenz sofort nach der Verwendung zurück.2~8speichern
9.1.3Bitte ändern Sie das Analyseprogramm nicht.
9.1.4Bitte verwenden Sie einen präzisen Spurpipeter
9.1.5Sobald der Betrieb begonnen hat, unterbrechen Sie bitte kein Programm.
9.1.6 ELISADie Wiederholbarkeit der Ergebnisse hängt stark vom Betriebsprozess ab, bitte beachten Sie die Anforderungen.
9.1.7Um Kreuzverschmutzung zu vermeiden, sollten jedes Standardprodukt und jede Probe mit einem anderen Saugkopf probiert werden.
9.1.8Lassen Sie den Saugkopf bei der Probenaufnahme nicht mit der Lösung in den Mikroporen oder der Innenfläche in Kontakt treten.
9.2 Schritte zur Analyse
9.2.1Vornummerierung, KennzeichnungB0Standort von Standardprodukten und Proben, Doppelloch-Test empfohlen
9.2.2Nehmen Sie die gewünschte Menge an Mikroporen (abnehmbare Mikroporenbalken), versiegeln Sie die überschüssigen Platten und legen Sie sie sofort zurück2~8speichern
9.2.3Probeverdünnung (10×konzentrierte Waschmittel (2Verdünnung in Arbeitsflüssigkeit(Destillationswasser oder deionisiertes Wasser verdünnt)
9.2.4inB0Fügen Sie in das Loch50µL 0.0ppbStandardlösungen
9.2.5In einzelne Standardlöcher hinzugefügt50 μlStandardlösungen
9.2.6In alle Probenlöcher hinzugefügt50µlProbenlösung
9.2.7Fügen Sie in alle Löcher50µlAntiparaffineAOTAAntikörper-Enzymverbindungen
9.2.8Schütteln Sie die Reaktionsplatte für ein paar Sekunden.
9.3 37Wärmebad30 Minuten(Von Zeit zu Zeit beim warmen Bad auf die Reaktionsplatte klappen, um den Doppellochfehler zu reduzieren)
9.3.1Entfernen Sie die Flüssigkeit aus dem Loch und waschen Sie die Mikroporplatte mit einer Waschmaschine5Zweitens sollte das letzte Mal auf das absorbierende Papier geschlagen werden, um die Flüssigkeit aus dem Loch zu entfernen.
9.4 Reaktion
9.4.1Unmittelbar nach Abschluss des Waschvorgangs mit einem Spurpipeter in jedes Mikropore hinzugefügt50µlFarbbildflüssigkeitAZusätzlich.50µlFarbbildflüssigkeitB; leichtes Schütteln der Reaktionsplatte, um sie zu vermischen
9.4.237Wärmebad10 Minuten
9.4.3In jedes Loch hinzufügen50µlEndflüssigkeit, vermischen
9.4.4in450nmUnter der Absorptionsprüfung ergeben sich5 MinutenLesen im Inneren.
10 Berechnung der Ergebnisse
10.1Quantitative Analyse
10.1.1Durchschnittswerte der erhaltenen Standardlösung und Probenabsorptionswerte pro Konzentration (BTeilung durch das erste Kriterium)0Absorptionswert (Standard)B0(wiederum multipliziert)100%Prozentsabsorptionswert.
BDurchschnittliche Absorptionswerte für Standardlösungen oder Probenlösungen
B00ppbDurchschnittlicher Absorptionswert der Standardlösung
10.1.2Mit TramycinAOTADer logarithmische Wert der Konzentration istXAchse, ProzentsabsorptionswertYAchsen, Zeichnen Sie Standardkurven. Abhängig vom Prozentsabsorptionswert der Probe können die Querkoordinaten des entsprechenden Punktes auf der Kurve erhalten werden, d. h. TransmycinAOTA(Logarithmus der Konzentration, die Gegenzahl ist die Messung der Flüssigkeit TramycinAOTA(Konzentration)Cppb
10.1.3Da die Probe vorverdünnt wurde, muss die anhand der Standardkurve erzielte Probenkonzentration erneut mit dem Verdünnungsvermöglichten multipliziert werden.
10.2 Halbquantitative Messung
10.1.1Optische halbquantitative Messung: Wählen Sie zuerst eine geeignete Standardflüssigkeit für den Betrieb mit der Probe und bestimmen Sie anhand des Farbvergleichs zwischen der Probe und dem Standardprodukt, ob der Probenkonzentrationswert kleiner oder größer ist als der Standardwert.
10.1.2Halbquantitative Messung des Instruments: Wählen Sie zuerst eine geeignete Standardflüssigkeit für den Betrieb mit der Probe aus, basierend auf dem Vergleich der hohen und niedrigen Absorptionswerte der Probe mit dem Standardprodukt, um zu bestimmen, ob der Probenkonzentrationswert kleiner oder größer ist als der Standardwert.

11 Spezifische
Substanz Kreuzreaktionen
TramycinAOTA100%

12 Parameter der Kit
Die Untersuchungsgrenze dieses Kits beträgt0.05ppb
B0Der optimale Absorptionswert sollte größer sein als1.0
Fehler in der Absorptionsplatte ist kleiner als8% ist der Fehler kleiner als15%。
Die mit dieser Anleitung zur Verfügung gestellte Gewebeprobenextraktionsmethode hat eine höhere Recyclingrate als80%。
13Der Standardkurvenbereich der Kits ist0.1ppb~8.1ppb
14 Einschränkungen der Analyse
Eine Probe, die in diesem Kit positiv getestet wird, sollte eine andere Methode wieHPLCoderGC/MSzu bestätigen.