A498 Leitfaden für menschliche Nierenkrebszellen

Produktbeschreibung:

Das spezielle A-498-Zellkulturmedium wurde sorgfältig vom technischen Team optimiert und nach langen Tests kann dieses Produkt einen optimalen Wachstumszustand für A-498-Zellen aufrechterhalten. Dieses Produkt enthält bereits eine Vielzahl von Zutaten, die für das Wachstum von A-498-Zellen erforderlich sind, ohne Zutaten hinzuzufügen und kann direkt für die Kultivierung von A-498-Zellen verwendet werden. Dieses Produkt ist ausschließlich für weitere wissenschaftliche Zwecke bestimmt und darf nicht für diagnostische, therapeutische, klinische, häusliche oder andere Zwecke verwendet werden.

Spezifische Schritte der Zellkultur:

1. Allgemein verwendete Ausrüstung

1. Vorbereitungsraum Ausrüstung

Einzeldestillator, Doppeldestillator, Säurezylinder, Backofen, Hochdrucktopf, Vorratsschrank (für nicht desinfizierte Gegenstände), Vorratsschrank (für desinfizierte Gegenstände), Verpackungstisch. Ausrüstung der Dosierkammer: Drehmomentwaage und elektronische Waage (Medikamente waagen),PH-WertMesser (Messkulturflüssigkeit)PH-WertWert), Magnetrührer (Konfiguration der Rührlösung in der Lösungskammer).

2. Ausrüstung des Kulturraums

Flüssigstickstoffbehälter, Lagerschränke (für Müll), Sonnenlicht und UV-Lampen, Luftreinigungsanlage, Kühlschrank (-80℃Klimaanlage, Kohlendioxidflasche, Seitentisch (Schreiben von Experimenten).

3. Geräte, die in sterilen Räumen platziert werden müssen

Zentrifuge (Sammelzellen), ultrareiner Arbeitstisch, Umkehrmikroskop,CO2Inkubator (Inkubationskultur), Wasserbad, Trioxydesinfektionsmaschine,4℃Kühlschrank (platziert)Serumund Kulturflüssigkeiten).

2. Steriler Betrieb

Sterilisation steriler Kammern

1.Regelmäßig reinigen Sie sterile Räume: Reinigen Sie einmal wöchentlich, zuerst mit Leitungswasser den Boden ziehen, den Tisch abwischen, den ultrasauberen Arbeitstisch usw.3‰Zur Sure oder New Jersey.0.5% Peroxidessigsäure abwischen.

2.CO2Inkubator Sterilisation: Zuerst verwendet3‰Xingel wischen und dann verwenden75% Alkohol abwischen oder0.5% Peroxyessigsäure, dann mit UV-Licht beleuchtet.

3.Sterilisation vor dem Experiment: Einschalten der UV-Lampe, Trioxid-Sterilisator, Luftreiniger-System20-30Minuten.

4.Sterilisation nach dem Experiment:75% Alkohol (3‰Xinjiang Jiuji) wischen Sie die Supernet Tisch, Seitentisch, Umkehr Mikroskop Träger Tisch.

Zellkulturmethoden:

01 Originale Kultivierungsschritte

Der Betriebsschritt der ursprünglichen Kultivierung lautet:→Trennung→Erziehung.

（1Entnahme: Es gibt verschiedene Entnahme-Methoden für verschiedene Gewebe, aber alle sollten das Material frisch und streng steril halten.

Die Operationsschritte der Zelltransplantation sind wie folgt:

（1Die Beobachtung der Zellmormologie und der Wachstumsdichte unter dem umgekehrten Mikroskop vor der Übertragung, wenn die Zellwachstumsdichte erreicht wird80%~90%Dann kann die Übertragung erfolgen.

（2Absaugen oder Gießen Sie die Kulturflüssigkeit in der Kulturflasche. beitretenPBSReinigung1~2Zweitens links und rechts, nachdem sie leicht schütteln.

（3Abhängig von der Größe der Kultivflasche die entsprechende Menge in die Flasche hinzufügenEDTAIn der Regel sollte der gesamte Kulturboden bedeckt werden.

（4Die Kulturflasche in37℃ CO2Aufbaukammer zur Verdauung,2 ~ 5 MinutenNach dem Entfernen unter dem umgekehrten Mikroskop zur Beobachtung, wenn gefunden, dass es70%~80%Wenn die Zellkonstraktion rundet und die Zellspalte größer wird, schlagen Sie die Kulturflasche vorsichtig, damit die restlichen Zellen losfallen und fügen Sie sie sofort hinzu2Die doppelte Menge der Kulturflüssigkeit unterbrecht die Verdauung, blast sanft mit dem Saugkopf und mischt gleichmäßig, um eine Überverdauung zu verhindern.

（5Saugen Sie alle Zellsuspensionen in das Zentrifugerrohr,1000 Umdrehungen/minZentrifugieren3 ~ 5 Minuten.

（61) Entfernen Sie den Reinigungsmittel, fügen Sie eine angemessene Menge an Kulturflüssigkeit hinzu, um die Zellen wieder zu suspendieren und sanft zu mischen, so dass die Zellen gleichmäßig verteilt werden.

（71) mit dem Saugkopf, um die angemessene Menge an Zellsuspension zu saugen, in einer neuen Kulturflasche mit der angemessenen Dichte zu impfen, die Kulturflüssigkeit zu füllen, gut zu schütteln und in37℃ CO2In der Kultivierungsbox kultiviert werden.

（8Bestimmung der Wechsel- oder Übertragungszeit je nach Zellwachstumsstatus und sogar Einfrieren der Zellen.

Hinweis:

（1(Strikt sterilen Betrieb, alle verwendeten Reagenzien und Verbrauchsmaterialien sollten steril sein, und müssen im sterilen ultrareinen Arbeitstisch UV-Bestrahlung30 MinutenUm eine Verschmutzung der Zellen zu vermeiden.

（2Die verwendete Kulturflüssigkeit muss für das Überleben und Wachstum der Zellen geeignet sein. Die Anforderungen an die Kulturflüssigkeit sind unterschiedlich, die aus verschiedenen Tierarten und Gewebetypen stammen, und die geeignete Kulturflüssigkeit kann bei Bedarf mit einer vorexperimentellen Methode ausgewählt werden.

（3Fetale Rinderserum spielt eine entscheidende Rolle bei der Aufrechterhaltung des Zellallebens und der Förderung des Zellwachstums. Das geeignete Rinderserum kann auf der Grundlage der Literatur oder des Vorexperiments ausgewählt werden. Sobald sie festgestellt ist, sollte sie bis zum Abschluss des Experiments verwendet werden.

（4Verdauungszellen sollten vermieden werden, wenn die Verdauungszeit zu kurz ist, die zur Verdauung führt, die Anzahl der Zellen ist gering, oder die Verdauungszeit zu lang ist, die zu einer freien Zellgruppe führt, wenn die Zellen beschädigt oder gestorben sind, was die Zellzahl und den Fortschritt des Experiments beeinflusst.

（5Bei der Zellzentrifugation sollte vermieden werden, dass eine zu geringe Anzahl von Zellen gesammelt wird oder dass eine zu große Zentrifugalkraft die Zellen schädigt. Nach der Entfernung der Zellfällung nach der Zentrifuge sollte die Zellfällung zuerst gespannt werden und die Kulturflüssigkeit wieder suspendiert werden, so dass die Zellschäden kleiner als die direkten Schläge sind und die Zelllenlebensrate verbessert werden können.

（6Wenn Sie die Zellen schlagen, sollten Sie versuchen, die Produktion von Zellen zu vermeiden, um die Zellen zu schädigen und den Zellzustand zu beeinflussen (der verbleibende Teil der Flüssigkeit im Saugkopf kann die Blasenproduktion reduzieren).

Produkte, die das Unternehmen verkauft: