Menschliche Knorpelzellen C28/I2

Zellbehandlung:

1) Erholung der gefrorenen Zellen:

wird enthaltenDas Gefrierrohr von 1 ml Zellsuspension wurde schnell in einem 37 ° C Wasserbad geschüttelt und aufgefroren und in ein Zentrifugerrohr mit 4-6 ml Medium gleichmäßig vermischt. Zentrifugieren Sie 3-5min unter 1000 RPM, entfernen Sie die Oberflüssigkeit und suspendieren Sie die Zellen im Medium. Die Zellsuspension wird dann über Nacht in eine Kulturflasche (oder Schalen) mit 6-8 ml Medium bei 37 ° C kultiviert. Am nächsten Tag wird das Zellwachstum und die Zelldichte unter dem Mikroskop beobachtet.

2) Zelltransplantation: Wenn die Zelldichte 80% -90% beträgt, kann eine Zelltransplantation durchgeführt werden.

Für die klebende Zelltransmission kann man sich auf die folgenden Methoden beziehen:

1. Entfernen Sie die Kultur und waschen Sie die Zellen 1-2 mal mit PBS ohne Kalzium- und Magnesiumionen.

2. 0,25% (w / v) -0,53 mM EDTA in die Flasche (T25 Flasche 1-2 mL, T75 Flasche 2-3 mL) hinzufügen, in einem 37 ° C-Gehäuse für 1-2 Minuten verdauen (schwer verdaubare Zellen können die Verdauungszeit angemessen verlängern), dann beobachten Sie die Zellverauung unter dem Mikroskop, wenn die Zellen sich größtenteils runden und ausfallen, nehmen Sie schnell den Arbeitstisch zurück, klicken Sie auf die Flasche und fügen Sie 3-4 ml des Mediums hinzu, das 10% FBS enthält, um die Verdauung zu beenden.

3. Nach sanftem Schlagen und Absaugen, 3-5 Minuten unter 1000 RPM zentrifugieren, die Oberflüssigkeit entfernen und 1-2 ml Kulturflüssigkeit hinzufügen. Die Zellsuspension wird im Verhältnis von 1: 2 in eine neue T25-Flasche aufgeteilt, 6-8 ml eines neuen Mediums hinzugefügt, das gemäß den Anforderungen der Anleitung konfiguriert ist, um das Wachstum der Zellen zu erhalten, und die nachfolgende Übertragung erfolgt im Verhältnis von 1: 2 bis 1: 5 je nach den tatsächlichen Umständen.

3) Zellfrieren: Nach Erhalt der Zellen wird empfohlen, eine Reihe von Zellsamen für die nachfolgenden Experimente bei der Kultivierung der ersten 3 Generationen einzufrieren.

Produktinformationen:

Zellen heißen nicht:XG-X10265； Interdermale Zellen

Alter und Geschlecht:

Hintergrund:

Biosicherheitsklasse:2

Spezifikationen der Zellen:1 x 106cells/T25 Kulturflasche oder 1ml Gefrierrohrverpackung

Branchenprüfung: Keine

Genexpression:

Erhaltung:

Anbaubedingungen: Gasphase:95% Luft + 5% Kohlendioxid; Temperatur: 37°C

Lagerbedingungen: frei von Gefrierserum, flüssiger Stickstoff speichern

Verdoppelt Zeit:

STR鉴定位点 Amelogenin: X, Y; CSF1PO: 10,12; D2S1338: 18,19; D3S1358: 17,18; D5S818: 12; D7S820: 10; D8S1179: 12,13; D13S317: 11,13; D16S539: 12; D18S51: 15,23; D19S433: 15; D21S11: 31,2; FGA: 22,23; PentaD: 10,11; PentaE: 10,16; TH01: 6,9,3; TPOX: 8; vWA: 15,18; D6S1043: 20; D12S391: 19,24; D2S441: 10, 11.3;

Behandlung nach Empfang der Zellen:

1) Nach dem Empfang der Zellen, 75% Alkohol desinfizierte Flasche Wand T25 Flasche in 37 ° C Kulturkammer für ca. 2-3 h platziert, wenn die Kulturflasche gebrochen, Flüssigkeit überlaufen und die Zellen kontaminiert sind, bitte kontaktieren Sie uns rechtzeitig, nachdem Sie ein Foto gemacht haben.

2) Bitte bestätigen Sie den Zellstand unter dem 4- oder 5X-Mikroskop und machen Sie gleichzeitig 2-3 Fotos der gerade empfangenen Zellen (10 x, 20 x) und ein Bild des Aussehens der Kulturflasche, um den Zellstand nach dem Verkauf zu erhalten.

3) Klebstoffzellen: Die Zellen werden 2-3 h in einem 37 ° C-Kulturraum platziert, beobachten Sie das Wachstum der Zellen und den Klebstoffzustand unter dem Mikroskop, einige Klebstoffzellen fallen während des Express-Transports aufgrund der Vibration ab und nach dem Abfall der Gruppierung. Wenn die Wachstumsdichte der Zellen unter dem Spiegel betrachtet wird, wenn sie unter 60% liegt, können Sie das Intrusionsmedium aus der Flasche entfernen (wenn keine Zellen, die an der Wand geklebt sind, zentrifugiert werden müssen, in die ursprüngliche Flasche wieder suspendiert werden), das neu zusammengesetzte Medium 6-8 ml hinzufügen und in die Zellkultur weiterkultivieren. Wenn die Zellwachstumsdichte über 70-80% beträgt, kann die Zelle übertragen werden. Während der Übertragung müssen Zellen, die aufgrund von Transportvibrationen abgefallen sind, zentrifugiert zurückgewinnt werden.

Transport und Lagerung:

Trockeneis Transport und Erholung von gut überlebenden Zellen

（1) 1mL Gefrierrohr Verpackung Trockeneis Transport, nach Erhalt von -80 Grad Kühlschrank aufbewahren über Nacht in flüssigen Stickstoff oder direkte Erholung, wenn Trockeneis gefunden hat, flüchtig und sauber, Gefrierrohr Flaschendeckel fallen, zerstört und Zellen kontaminiert, bitte kontaktieren Sie uns sofort.

（2) T25-Flasche Erholung von überlebenden Zellen bei normaler Temperatur versendet, nach Empfang nach der Behandlung der Zellen nach Empfang.

Produkte, die das Unternehmen verkauft: