Mikrovaskuläre Endotelzellen des Schweineherzes

Primärzellen vs. Zelllinien:

Zellen, die mittels enzymatischer oder mechanischer Methoden direkt aus menschlichen oder tierischen Geweben isoliert werden. Streng gesagt, die Zellen, die vor der Übertragung des Körpers isoliert wurden, werden als Primärzellen bezeichnet, die überwiegende Mehrheit der Primärzellen kann sich 10-15 Mal in vitro teilen (dies hängt von der Länge der Telomere der Zelle ab), zusammen mit der Entnahme von Materialien, Kosten und anderen Faktoren, werden in der Regel die Zellen innerhalb der ersten bis zehnten Generation als Primärzellen bezeichnet.

‍Mikrovaskuläre Endotelzellen des Schweineherzes

Eigenschaften:

Zellen Einführung:

Mikrovaskuläres Endotel des Schweineherzes wird vom Herzgewebe getrennt; Das Herz ist ein wichtiges Organ im Körper der Wirbeltiere, dessen Hauptfunktion es ist, den Blutfluss zu belasten und das Blut zu verschiedenen Körperteilen zu bringen. Das Herz besteht aus dem Herzmuskel und besteht aus vier Räumen: linker, rechter und linker Kammer. Zwischen dem linken und rechten Kammer und dem linken und rechten Kammer sind beide durch Abstände getrennt und sind daher nicht miteinander verbunden; zwischen dem Kammer und dem Kammer gibt es Ventile (Kammerklappen), die es ermöglichen, dass Blut nur über den Kammer fließt und nicht zurückfließt. Die Rolle des Herzens ist es, den Blutfluss zu fördern, ausreichend Blutfluss für Organe und Gewebe zu liefern, um Sauerstoff und verschiedene Nährstoffe zu versorgen und die Endprodukte des Stoffwechsels (wie Kohlendioxid, anorganische Salze, Harnstoff und Harnsäure usw.) zu entfernen, damit die Zellen ihren normalen Stoffwechsel und ihre Funktion aufrechterhalten können. Herzmikrovaskuläre Endotelzellen sind flache, epiteliale Zellen, die die Oberfläche der Herzmikrovaskulären Hohlfläche bilden. Die biologisch aktiven Substanzen, die sie erzeugt und sekretiert, spielen eine wichtige Rolle bei der Aufrechterhaltung der Gefäßspannung, der Regulierung des Blutdrucks, der Antithrombose und so weiter. Sie haben eine wichtige pathophysiologische Bedeutung bei der Entstehung von Herz-Kreislauf-Erkrankungen. In den letzten Jahren hat eine Vielzahl von Forschungen gezeigt, dass die Funktion und pathologische Veränderungen der kardiovaskulären Endotelzellen direkt die Funktion der kardiovaskulären Zellen beeinflussen, aber auch eine Vielzahl von Toxinen, Entzündungsfaktoren und wichtigen Zielen wie Viren, die als Zellmodelle für in vitro-Studien in Herzmuskelschämie verwendet werden.-Reinperfusion spielt eine wichtige Rolle in der Erscheinungsmechanismus und interzelluläre parazelluläre Zellwachstumsfaktoren Forschung.

Methodenbeschreibung:

Labor-Isolierung von Schweineherz Mikrovaskuläre EndotheliometrieCD31Immunofluoreszenz-Identifizierung, erreichbare Reinheit90%oben und enthält nichtHIV-1undHBVundHCVBronogene, Bakterien, Hefe und Pilze usw.

Qualitätsprüfung:

Labor-Isolierung Schweineherz Mikrovaskuläre Endotel mit Collagenase-Gemischte Verdauungsmethode in Kombination mit Dichtegradientenzentrifuge, dann durch Endotelzellen spezielle Medienkultur-Screening vorbereitet, die gesamte Zellzahl beträgt etwa5×105 Zellen/Die Flasche.

Ausbildungsinformationen:

Paketbedingungen:PLL（0,1 mg/mlGelatine (0.1%）

Kulturmedium: Basismedium, enthaltendFBSundEGFundbFGFundIGFundVEGFundHeparinundHydrocortisonundPenicillinundStreptomycinwarten

Wechselfrequenz: pro2-3Einmal am Tag Flüssigkeit wechseln

Wachstumsmerkmale: Wandkleber

Zellmorma: Endotelzell

Eigenschaften: übertragbar2-3Generation

Verdauungsflüssigkeit:0.25%

Anbaubedingungen: Gasphase: Luft,95%；CO2，5%

Ursprüngliche Zellen werden in der Regel bis zu 10 Generationen übertragen, die meisten Zellen sterben durch Altern, aber es gibt sehr wenige Zellen, die in der Lage sind, die "Krise" zu überleben und weiterzugeben, die überlebenden Zellen können in der Regel bis zu 40-50 Generationen übertragen werden, die Zellstämme genannt werden. Wenn nach 50 Generationen wieder eine "Krise" auftritt, dann verändert sich das genetische Material einiger Zellen und trägt krebsförmige Eigenschaften, die sich möglicherweise unbegrenzt weiterverbreiten, die als Zelllinien bezeichnet werden.

Es wird auch angenommen, dass sich Zelllinien auf eine Zellpopulation beziehen, die sich nach erfolgreicher Übertragung der ursprünglichen Zellkultur fortpflanzt. Es bezieht sich auch auf Kulturzellen, die langfristig kontinuierlich übertragen werden können. Daraus wurde die spätere endliche Zelllinie und die unendliche Zelllinie hervorgebracht, daher bezieht sich die Zelllinie im engen Sinne auf kontinuierlich übertragbare Zellen und im breiten Sinne auf übertragbare Zellen. Ein Zellstamm ist eine Methode der Selektion oder Klonbildung, bei der eine einzelne Zelle mit speziellen Eigenschaften oder Markern aus einer ursprünglichen Kultur oder Zelllinie gewonnen wird, die als Zellstamm bezeichnet wird.

Die Zelllinie hat die Vorteile der einfachen Kultivierung, Vielfalt, Preis, unbegrenzte Übertragung und andere Vorteile, aber auch sehr leicht bei der Kultivierung, Gefrierung und Kreuzkontamination Probleme der Fehlerkennung auftreten.

Produkte, die das Unternehmen verkauft:

Mäuse Adelinreleasin-Rezeptoren(GHR)ELISAReagenzkist96T / 48T

ELISA-Kit für Koagulationsfaktor IX (FIX) bei RattenRattenIX(FIX)ELISAReagenzkist

HumanKomplexfragme4a,C4aELISAKitAllergie gegen Toxine/Ergänzungsfragmente4(C4a)ELISAReagenzkist96T / 48TImportaufteilung

Humanbasicfibroblastwachstumsfaktor9,bFGF-9ELISAKit menschliche alkalische fibroblastische Wachstumsfaktoren9(bFGF-9)ELISASpezifikationen des Reagenzkists:96T / 48T

Quantifizierungstest-Kit für pflanzliche Direktkettenstärke20Nächster

Humaerminaldeoxynucleotidylansferase, TdTELISAKitHumane terminale Deoxynukleotidtransferase(TdT)ELISASpezifikationen des Reagenzkists:96T / 48T

豚鼠内皮素1(ET-1)ELISAKit Elisa. 96T / 48T

SchweineimmunglobulineE(IgE)ELISAKit Elisa. 96T / 48T

SchweineimmunglobulineEine völlig zivilisierte Sicht Elisa. 96T / 48T

Metalprotease-Inhibitoren für Schweine1(TIMP-1)ELISAKit Elisa. 96T / 48T

Löslichkeit bei RattenCD80(sCD80)ELISATest-Kit, englischer Name:sCD80 ELISA Kit

Maus desmin (Des) ELISA KitMaus Knoten Protein(Des)ELISAReagenzkist

MausAlaninaminoansferase, ALTELISAKitMäuse-Aminotransferase(ALT)ELISAReagenzkist96T / 48TImportaufteilung

Kliakindaparathyroidhormon, pthelipainSpezifikationen des menschlichen Schilddrüsenhormons:48T / 96T

Isotope Markierung Zelltelomerase AktivitätAPElektrophorese-Analyse-Kit10Nächster

ELISAKitPI3KRatten0Muskelsäure3Kinase Spezifikationen:48T / 96T

LY9Reorganisation der MäuseLY9 / CD229 / SLAMF3Protein(SeineEtikett(Protein)

AMH/MIS MuellerianInhibitor Antigen1mgAMH/MIS MuellerianInhibitor Antigen

ANGPTL4UmstrukturierenANGPTL4ProteinFcEtikett(Protein)

FLRT1 Protein MenschUmstrukturierenFLRT1Protein(SeineEtikett)

HEPACAM2 Protein RatteReorganisation der RatteHepaCAM2Protein(SeineEtikett)

Mikrovaskuläre Endotelzellen des SchweineherzesHalblaktose-Kollektine4 (GAL4)Rekombiniertes ProteinRekombinentes Galektin 4 (GAL4)

FLRT1 Protein MenschUmstrukturierenFLRT1Protein(SeineEtikett)

ACPPReorganisation der MäuseProstatasäure Phosphatase / ACPPProtein(SeineEtikett(Protein)

IFNGR1 Protein CynomolgusRestrukturieren der KrabbenfresserIFNGR / IFNGR1Protein(SeineEtikett)

AK4UmstrukturierenAK4 / Adenylatkinase 4 / AK3L1ProteinProtein

Spezifische Schritte der primitiven Zellkultur:

1, Vorbereitung: Nehmen Sie alle Arten von desinfizierten Kulturprodukten auf den Reinigungstisch und UV-Desinfektion für 20 Minuten. Waschen Sie Ihre Hände vor der Arbeit und wischen Sie die Hände mit 75% Alkohol bis zum Ellenbogen.

2, Layout: brennen Sie die Alkohollampe an und installieren Sie die Suchhütte.

3. Behandlung von Gewebe: Stellen Sie den Gewebeblock in den Becher und waschen Sie ihn 2-3 Mal mit Hanks-Flüssigkeit ab, um Blutflecken zu entfernen; Wenn der Verdacht besteht, dass das Gewebe kontaminiert sein könnte, kann es zuerst 30-60 Minuten in eine Mischung mit blauer Farbe gelegt werden.

Verdauung: entweder mit einem thermostatischen Wasserbad oder in einem 37 ° C-Wärmekammer verdauen können, Verdauung sollte alle 20 Minuten geschüttelt werden, wie mit einem elektromagnetischen thermostatischen Rührer verdauen besser. Die Verdauungszeit hängt von der Größe des Gewebeblocks und der Härte des Gewebes ab.

6, Trennung: während des Verdauungsprozesses, wenn die Verdauungsflüssigkeit trüb ist, kann ein wenig Verdauungsflüssigkeit unter dem Spiegel angesaugt werden, wenn das Gewebe in Zellgruppen oder einzelne Zellen verstreut ist, sofort die Verdauung beenden, sofort durch geeignete Edelstahlsiebe, die noch nicht ausreichend verdauten Gewebeblöcke zu filtern. 5 Minuten lang mit einer niedrigen Geschwindigkeit (500-1000 U/min) zentrifugierte Verdauungsflüssigkeit, das Oberserum aussaugen und eine angemessene Menge an Kulturflüssigkeit mit Serum hinzufügen.

7, Zählen: Zählen Sie mit der Zählplatte, wie die Zellsuspension Zelldichte zu groß ist, und fügen Sie die Kulturflüssigkeit nach der Anpassung in die Kulturflasche. Für die meisten Zellen ist der pH-Wert im Bereich von 7,2-7,4 erforderlich, und die Kulturflüssigkeit ist leicht rot, wie die Farbe gelb ist, was darauf hindeutet, dass die Flüssigkeit sich säurig macht und mit NaHCO3 angepasst werden kann.

8, Kultur: in der 37 ° C-Wärmekammer-Kultur, wie mit CO2-Wärmekammer-Kultur, muss die Flaschenmündung mit einem Garb-Baumwollstopfen oder einer Schraubkappe verstopft werden, Garb-Stopfen erzeugen Schimmel, bei jedem Flüssigkeitsaustausch müssen neue Stopfen ausgetauscht werden.