22RV1 (menschliche Prostatakrebszelle)

22RV1 (menschliche Prostatakrebszelle)

Nicht nennen. 22RV1; 22Rv-1; 22rV1; CWR22-Rv1; CWR22R-V1; CWR22-R1; CWR22Rv1; Der CWR22R

Gattung Menschen

Alter (Geschlecht) MannErwachsene

Organisationsquellen Prostata

Wachstumsmerkmale Wandzellen

Zellmorm Epiteliale Zellen

Hintergrundbeschreibung 22RV1 ist eine menschliche Prostatakrebsepithelialzelllinie von exotischen Transplantationen (kontinuierlich in Mäusen übertragen, die eine Kastration verursacht haben, die einen Rückgang des Prostatakrebs verursacht hat und nach der Injektion des androgenen, vertrauenswürdigen Typs CWR22 ihres Vaters wiederkehrt); Die 22RV1-Zelllinie drückt prostatenspezifische Antigene aus. Dihydroxytestosteron stimuliert leicht das Wachstum von 22RV1-Zellen, das gelöste Produkt reagiert mit Antikörpern gegen den androgenen Rezeptor durch den Western Blot-Test; EGF stimuliert das Zellwachstum von 22RV1, aber TGFβ-1 kann das Zellwachstum nicht hemmen; 22RV1 kann bei nackten Ratten tumorisieren.

Biosicherheitsklasse 2

Wachstumsmedium RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P / S

Empfohlenes Übertragungsverhältnis 1:3-1:4

Empfohlene Wechselfrequenz 2-3 Mal / Woche

Zeit verdoppeln ~ 40 Stunden

Gefrierbedingungen

Gefrierflüssigkeit:55% Basismedium + 40% FBS + 5% DMSO

Temperatur: Flüssiger Stickstoff

Aufbaubedingungen

Gas: Luft,95%； CO2, 5 Prozent

Temperatur:37℃

Tumorogen Ja, bildet Tumoren bei nackten Mäusen.

Rezeptor-Expression Androgenrezeptor

Hinweise Die Entfernung von DMSO durch Zentrifuge ist bei der Erholung von 22RV1-Zellen erforderlich. In der ersten Phase der Gefrierzellerholung ist die Menge an Klebstoffen gering, Cluster sind lose Klebstoffen, aber schließlich werden die Zellen ausgeflacht und sich in eine gute Einzelschicht ausbreiten, ein Prozess, der 4-5 Tage dauert. Die Zellen wachsen langsam und können nur bis zu 90% der Konvergenz wachsen. Die Erholungsüberlebensrate nach dem Einfrieren der Zellen ist nicht hoch, das empfohlene Verhältnis der Gefrierflüssigkeit ist 90% Serum + 10% DMSO, mit hochwertigem Serum.

Hinweis:

1, nach dem Empfang der Zellen, wenn Trockeneis ist flüchtig und sauber, Gefrierrohr Flaschendeckel fallen, gebrochen und die Zellen sind verschmutzt, bitte kontaktieren Sie uns sofort.

2, die empfangenen Zellen nicht zuerst den Flaschendeckel öffnen, den Flaschenkörper abwischen Alkohol nach 2-4 Stunden (abhängig von der Zelldichte) in der Kulturkammer stehen lassen, um den Zellzustand zu stabilisieren. Anschließend beobachten Sie das Zellwachstum unter dem umgekehrten Mikroskop und fotografieren Sie die Zellen in verschiedenen Vielfachen (es wird empfohlen, ein Foto des Gesamtaussehens der Zellen zu machen, um die Farbe des Mediums und ob es Leckagen gibt, und anschließend den Zellstand unter dem Mikroskop aufzunehmen, je 100 *, 200 *), um zu beobachten, ob die Zellen während des Transports kontaminiert sind. als Grundlage für unseren Verkauf.

Da der Zellstand von Umwelt-, Betriebs- und Transportfaktoren beeinflusst wird, gewährleistet das Unternehmen nur, dass der Kunde den Zellstand innerhalb einer Woche nach dem Empfang der Zelle erhält, so dass der Kunde nach dem Verkauf den Nachweis des Empfangs der Zelle vorlegen muss und der Kunde die Lieferzeit zur Verfügung stellt und das Kundendienstpersonal nach der Erkenntnis des Problems kommuniziert, kann der Zeitraum nicht größer als 7 Tage sein.

Alle tierischen Zellen werden als potenziell biologisch gefährlich angesehen, müssen in einem zweiten Biosicherheitsstand betrieben werden, und achten Sie bitte auf den Schutz, alle Abfälle und Gefäße, die mit dieser Zelle in Berührung kamen, müssen sterilisiert werden, bevor sie weggeworfen werden können.

Zellbehandlung:

1) Erholung der Gefrierzellen: Die Gefrierröhre, die 1 ml Zellsuspension enthält, wird schnell in einem 37 ° C-Wasserbad geschüttelt und aufgefroren und gleichmäßig in ein Zentrifugerrohr mit 4-6 ml Medium vermischt. Zentrifugieren Sie 3-5min unter 1000 RPM, entfernen Sie die Oberflüssigkeit und suspendieren Sie die Zellen im Medium. Die Zellsuspension wird dann über Nacht in eine Kulturflasche (oder Schalen) mit 6-8 ml Medium bei 37 ° C kultiviert. Am nächsten Tag wird das Zellwachstum und die Zelldichte unter dem Mikroskop beobachtet.

2) Zelltransplantation: Wenn die Zelldichte 70% -90% beträgt, kann eine Zelltransplantation durchgeführt werden. Die Zelle ist eine suspendierte und leicht klebende Zelle, die sich auf die folgenden Methoden beziehen kann:

1. Sammlung: Sammeln Sie die suspendierten Zellen in der Kulturflasche in die Zentrifuge. Waschen Sie die Zellen 1-2 mal mit PBS ohne Kalzium und Magnesium. Da die Zellen nach der PBS-Schmierung nicht fest kleben, fallen die Zellen ab, so dass PBS auch in die Zentrifuge zurückgewinnt wird.

2, 0,25% (w / v) 0,53 mM EDTA in der Kultivflasche (T25 Flasche 1-2 mL, T75 Flasche 2-3 mL) in 37 ° C in der Kultivkammer für 1-2 Minuten verdauen (schwer verdaubare Zellen können die Verdauungszeit angemessen verlängern), dann beobachten Sie die Zellverauung unter dem Mikroskop, wenn die Zellen sich größtenteils runden und schnell wieder auf den Arbeitstisch fallen, klicken Sie auf die Kultivflasche und fügen Sie 3-4 ml des Mediums hinzu, das 10% FBS enthält, um die Verdauung zu beenden.

3, die gesammelten Zellen in der Suspension, die Zellen in der PBS-Reinigungsflüssigkeit und die verdauten Klebstoffzellen in 1000 rpm Zentrifuge für 5 Minuten, entfernen Sie die Oberflüssigkeit, fügen Sie 1-2 ml Kulturflüssigkeit hinzu und mischen Sie die Zellsuspension im Verhältnis von 1: 2 in die neue T25-Flasche aufteilen, fügen Sie 6-8 ml des neuen Mediums hinzu, das gemäß den Anforderungen der Anleitung konfiguriert ist, um die Wachstumsleistung der Zelle aufrechtzuerhalten, und die nachfolgende Übertragung erfolgt im Verhältnis von 1: 2 ~ 1: 5 nach den tatsächlichen Umständen.

3) Zellfrieren: Nach Erhalt der Zellen wird empfohlen, eine Reihe von Zellsamen für die nachfolgenden Experimente bei der Kultivierung der ersten 3 Generationen einzufrieren. Hier ist ein Beispiel für die Flasche T25:

1, wenn die Zellen gefriert werden, sammeln Sie verdaute Zellen in die Zentrifuge nach dem Prozess der Zelltransmission, können Sie die Blutzählplatte verwenden, um die Gefrierdichte der Zellen zu bestimmen. Die empfohlene Gefrierdichte für allgemeine Zellen beträgt 1 x 106 ~ 1 x 107 lebende Zellen / ml.

2, 1000 rpm Zentrifuge 3-5min, entfernen Sie die Oberfläche. Zurücksuspendieren Sie die Zellen mit der vorbereiteten Zellfrierflüssigkeit, verteilen Sie die Zellen in ein Gefrierrohr nach 1 ml Gefrierflüssigkeit, die 1 x 106 ~ 1 x 107 lebende Zellen / ml enthält, und kennzeichnen Sie den Namen, die Algebra, das Datum und andere Informationen.

Legen Sie die Zellen, die eingefroren werden sollen, in die Kühlbox des Programms und übernachten Sie in einem -80-Grad-Kühlschrank, bevor sie in einen flüssigen Stickstoffbehälter gelagert werden. Aufzeichnen Sie auch die Position der Gefrierrohre im flüssigen Stickstoffbehälter für die spätere Überprüfung und Verwendung.

Betriebsschritte:

Schritt 1: Entfernen Sie das serofreie, unprogrammatische Gefriermittel aus dem Kühlschrank

Schritt 2: Zentrifugieren Sie die Zellen in der Logarithmus-Wachstumsperiode sammeln (Zellen verdauen und zentrifugieren, Zellen in der Suspension direkt zentrifugieren, Drehzahl 1200rpm oder 250g, Zeit 3min)

Schritt 3: Entfernen Sie das Oberserum und fügen Sie eine angemessene Menge serofreier nicht-prozeduraler Gefrierflüssigkeit hinzu und suspendieren Sie die Zellen wieder

Schritt 4: Verteilen Sie die Menge von 1 bis 1,5 ml / Rohr in das Gefrierrohr, schrauben Sie den Rohrdeckel fest und markieren Sie es gut

Schritt 5: Das Gefrierrohr direkt in den Kühlschrank bei -80 ° C verschieben und nach 24 Stunden in flüssigen Stickstoff übertragen

Eine manuelle Gradientkühlung kann ausgewählt werden, wenn keine Gefrierbox oder eine nicht-programmatische Gefrierflüssigkeit vorhanden ist. Die manuelle Gradientkühlung ist jedoch nicht für alle Zellen geeignet und der Effekt ist instabil und erfordert zunächst einen Gefriertest.

Produkte, die das Unternehmen verkauft:

CCRF-CEM (menschliche Akute Lymphozytenläukämie T-Lymphozyten)

A9 (Bindegewebezellen der Maus unter der Haut)

AAV-293 (menschliche embryonale Nierenzellen)

Acc-2 (menschliche zystische Krebszellen)

ACHN (menschliche Nierenzellenkrebszellen)

AGS (menschliche Magenkrebszellen)

Ana-1 (Mausmakrophagen)

Anglne (menschliche Eierstockkrebszellen)

AR42J (Exokrine Bauchspeicheldrüsenzellen von Ratten)

ARPE-19 (menschliche Retina-Epithelizellen)

AsPC-1 (menschliche metastasierte Bauchspeicheldrüsenkrebszellen)

AtT-20 (Maus-Hypophyse-Tumorzellen)

B16 (Mäusenmelanomzellen)

Bcap-37 (menschliche Brustkrebszellen)

BEL-7402 (menschliche Leberkrebszellen)

Schweinedarmtriebladfaktor(ITF) ELISA-Testkit

Menschliche Lymphotiksuβ(LTB) Testkits

Weißes Schweinsu3(IL-3) Testkits

Hamster-Metallproteinmei9/Gelatinase B (MMP-9/Gelatinase B) ELISA-Kit

Schweineblauen Ohr VirusRT-PCR-Kit

Weißer Sturrbogen-VirusPCR-Kit

BallvirusPCR-Testkit

Inner Radiation BakterienPCR-Testkit

Arlette StaphylococcusPCR-Kit

Gewebe Plasma allgemeinPCR-Kit

Gen veränderte PflanzenPAT-Gen-PCR-Testkit

22RV1 (menschliche Prostatakrebszelle)Arlette StaphylococcusPCR-Kit

1 (RT-1 Antiherpes Virus Typ 1 PCR-Kit)

KegelwormPCR-Kit

Afrikanische SchweinepestPCR-Testkit