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Coenzym I NAD(H) Gehalt Testbox sichtbare Spektrophotometrie

VerhandlungsfähigAktualisieren am02/19

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Coenzym I NAD(H) Gehalt Testbox sichtbare Spektrophotomethode Verwandte Produkte: 6 Phosphat Glucose Dehydrogenase (G6PDH) / Glucose 6 Phosphat Dehydrogenase Testbox 6 Phosphat Glucose Dehydrogenase (G6PDH) / Glucose 6 Phosphat Dehydrogenase Testbox Spurmethode 6 Phosphat Glucose Dehydrogenase (G6PDH) / Glucose 6 Phosphat Dehydrogenase Testbox 6 Phosphat Glucose Dehydrogenase (G6PDH) / Glucose 6 Phosphat Dehydrogenase Testbox UV-Spektrophotomethode Cytose Plasma Citrate Dehydrogenase (ICDHc) Testbox Spurmethode Cytose Plasma Citrate Dehydrogenase (ICDHc)

Produktdetails

Besonderer Hinweis: Dieses Produkt dient ausschließlich der wissenschaftlichen Forschung und darf nicht zur direkten klinischen Untersuchung am Menschen verwendet werden.

Produktname:Coenzym I NAD(H) Gehalt Testbox sichtbare Spektrophotometrie
Produktspezifikationen: 50 Röhre / 24 Modelle
Prüfmethode: Sichtbare Spektrophotometrie
Artikelnummer: BK-01S6322
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Produktvorstellung:

Bedeutung bestimmen
Coenzym I NAD (H) ist weit verbreitet in Tieren, Pflanzen, Mikroorganismen und Kulturzellen, NAD + ist der primäre Wasserstoffrezeptor der Glykoenzymlyse (EMP) und des Tricarbonsäure-Kreislaufs (TCA), der erzeugte NADH überträgt Elektronen an Sauerstoff über die Atemelektronenkette (ETC), während ATP synthetisiert wird, bildet eine große Menge an ROS, während NADH als NAD + regeneriert wird. Die Oxidationsreaktionen im Abbau der drei wichtigsten Stoffwechselstoffe Zucker, Fett und Protein erfolgen überwiegend durch dieses System. Höhe und Tiefe des NAD(H)-Gehalts und des NADH/NAD+-Verhältnisses können zur Bewertung der Stärke der Glykolyse und des TCA-Zyklus verwendet werden. Ein höheres Verhältnis von NAD(H) und NADH/NAD+ deutet darauf hin, dass die Zellen einen höheren Sauerstoffverbrauch atmen und sich in einem peroxidierten Zustand befinden. Darüber hinaus hemmt ein erhöhtes NADH/NAD+-Verhältnis auch die Glykolyse und den TCA-Zyklus. Darüber hinaus spielen NAD+ Abbauprodukte eine wichtige regulatorische Rolle bei der Zellsignalisierung, dem Stoffwechsel und der Genexpression.
Bestimmungsprinzip
Die Extraktion von NAD + und NADH in der Probe mit saurem und alkalischem Extrakt, NADH durch die Wasserstoffübertragung von PMS, reduziertes oxidiertes Thiazolblau (MTT) als Methylchan, Detektion von Absorptionswerten bei 570 nm; NAD + kann durch Ethanoldehydrogenase zu NADH reduziert werden und mit der MTT-Reduktionsmethode nachgewiesen werden.
Eigene Geräte und Zubehör
Sichtbares Spektrophotometer, Tischzentrifuge, Pipette, 1 ml Glasbehälter, Grill, Eis und destilliertes Wasser.

Benötigte Geräte und Zubehör:

Sichtbares Spektrophotometer, 1 mL Glasschale (1 cm Durchmesser), Tieftemperaturzentrifuge, Pipette, Grinder, Eis und Destillationswasser

Bestimmung der Superoxid-Discriminase (SOD):

Es wird empfohlen, vor dem offiziellen Experiment 2 Proben zur Vorhersage auszuwählen, um die Situation der Proben zu verstehen, sich mit dem Experimentsprozess vertraut zu machen und Experimente zu vermeiden.

Proben und Reagenzien verschwendet!

1. Probenvorbereitung

Organisationsproben:

Nehmen Sie ca. 0,1 g Gewebe (0,25 g mit ausreichender Feuchtigkeit wünschenswert), fügen Sie 1 ml Extrakt bei 4 ° C oder Eisbad hinzu

Homogenisieren (oder mit verschiedenen gängigen Homogenatoren). 4ºC x 12000rpm Zentrifugieren 10min, nehmen Sie die Klare als zu prüfende Flüssigkeit.

Hinweis: Bei Erhöhung der Probenvolumen kann die Extraktion im Verhältnis von Gewebemasse (g): Extraktionsflüssigkeitsvolumen (mL) von 1: 5 bis 10 durchgeführt werden.

Bakterien/Zellproben:

Sammeln Sie zunächst Bakterien oder Zellen in das Zentrifugerrohr und entfernen Sie es. Nehmen Sie etwa 5 Millionen Bakterien oder Zellen und fügen Sie 1 ml hinzu

Extrahieren Sie die Flüssigkeit, zerstören Sie Bakterien oder Zellen mit Ultraschall (Eisbad, Leistung 200W, Ultraschall 3s, Intervall 10s, 30 Wiederholungen);

12000rpm 4 ° C Zentrifuge 10min, entfernen und auf dem Eis zu testen.

Hinweis: Wenn die Probenmenge erhöht wird, kann die Anzahl der Bakterien / Zellen (10)

4): Extraktion von Flüssigkeit (mL) im Verhältnis von 500 bis 1000: 1. Flüssigkeitsproben: Direkte Prüfung; Wenn es trüb ist, nehmen Sie nach der Zentrifuge die klare Prüfung ab.

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Experimentelle Methodik:
Zubereitung von Hepatin:
Verkaufliches Hepatin-Gefriertrocknenpulver 140 Einheiten / mg, 1 Gramm Flasche, 140.000 Einheiten pro Flasche, 0,1 Gramm Hepatin-Gefriertrocknenpulver, 5 ml physiologisches Salzwasser hinzufügen, 2800 Einheiten / ml zusammenstellen. Nehmen Sie 50 ~ 100 μl feuchte Röhrenwand, kann Blut gegen Gerinnung 3 ~ 5 ml, Blut wird nicht gerinnen. Mäuse können leicht gerinnen, daher ist es am besten, etwas stärker zu sein. 0,1 Gramm Hepatin gefriertrocknetes Pulver, 3 ml physiologisches Salzwasser aufgelöst, 50 bis 100 μl, kann gegen Blut von 2 bis 4 ml.
Zubereitung von Hepatin-Antikoagulation: Nehmen Sie 0,1 g Hepatin-Gefriertrocknenpulver und fügen Sie 2,5 ml physiologisches Salzwasser hinzu. Nehmen Sie 100 μl bis 150 μl in ein Kunststoff- oder Glasrohr, feuchte Rohrwand, unter 80 ° C in einem kleinen Ofen (kann mit einem kleinen Ofen gebraten werden), drehen Sie sich horizontal, drehen Sie sich alle 5 bis 10 Minuten, bis Sie nach der Trocknung bei 4 ° C aufbewahren, so dass 2 bis 5 ml Blut nicht gerinnen kann.
2. Sammlung von Blutproben:
Vollblut wird je nach den gesammelten Bedingungen in Antikoagulation und Antikoagulation unterteilt. Gleichzeitig wird die obere gelbe Flüssigkeit, die nicht gegen Kogulation isoliert, die wir Serum nennen; Die gelbe obere Flüssigkeit, die von der Antikoagulation isoliert wird, nennen wir Plasma.
1, nicht anti-koagulation sammeln Serum: wird gut Vollblut sammeln, 1 bis 2 Stunden stehen lassen, direkt niedrige Geschwindigkeit Zentrifuge zu trennen, um das Serum zu verwenden oder zu bewahren.
Antikoagulante Sammlung von Plasma: Antikoagulante Vollblut sammeln, nach dem vollständigen Antikoagulation leicht umkehren, kann das Plasma direkt mit niedriger Geschwindigkeit zentrifugiert werden (auch für etwa eine halbe Stunde und dann mit niedriger Geschwindigkeit zentrifugiert werden). Abhängig von den Eigenschaften der verschiedenen Antikoagulante wählen Sie das geeignete Antikoagulant aus. Im Labor häufig verwendete Antikoagulante sind verschiedene Salze von Hepatin, EDTA und.
Wählen Sie Antikoagulation Aufmerksamkeit:
Die Menge des Antikoagulants, das zu jeder Probe hinzugefügt wird, muss gleichzeitig die Menge des genommenen Vollbluts möglichst konsistent sein;
Nach der Sammlung von Antikoagulationsvollem Blut muss es leicht umgekehrt werden, um eine vollständige Antikoagulation zu verhindern, dass ein Teil des Blutes nicht mit Antikoagulationsmitteln in Kontakt steht und zur Gerinnung führt;
Antikoagulantes Vollblut sammelt relativ viel Plasma (1 ml Antikoagulantes Vollblut kann 0,4 bis 0,5 ml Plasma isolieren);
Nach der Gefrieraufbewahrung des Antikoagulationsplasmas kann es bei der Auflösung zu flokularen Trübungen kommen, wenn vorhanden, müssen Sie nach der Entfernung des Trübens zentrifugieren
zur Messung verwendet.

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Kreatinkinase (CK) Testbox Kreatinkinase (CK) Testbox Spurmethode Spurmethode

Phospho-GEF H1 (Ser886) Phosphorylierter Rhobirdotid-Austauschfaktor-2-Antikörper

Phospho-Afadin (Ser1721) phosphoryliert filamentose Actin-bindende Protein-Antikörper

ARPC1A Antikörper für Actin 2/3 Subtyp 1A

ANKRD32 ANKRD32 ANKRD32 ANKRD32 ANKRD32 ANKRD32 ANKRD32 ANKRD32 ANKRD32 ANKRD32 ANKRD32 ANKRD32 ANKRD32

ATXN7L3B Protein 3B Antikörper

POP1 Infektionsprotein 1 Antikörper

ASB5 ANKERPROTEIN-REPETITIERUNGSSEQUENZ - ZYTOKIN-SIGNALINHIBITOR BOX-PROTEIN-FAMILY 5 Antikörper

ABP1 Pflanzenwachstumshormon ABP1 Antikörper

Antikörper gegen Phospho-ATF2 (Thr55) Phosphorylationsaktivierender Replikationsfaktor 2

ADRA1B alpha 1 Adrenalerzeptor B Antikörper

Bcl-2 alpha Antikörper

BAT5 Antikörper gegen Transkriptinprotein 5 mit Antigen B

BTBD1 Antikörper gegen BTB/POZ-Domänenprotein 1 (NS5A-Retrokliptoprotein 8 des Hepatitis C-Virus)

BCL7B Protein Antikörper

Coenzym I NAD(H) Gehalt Testbox sichtbare SpektrophotometrieBNC2 alkalisches Nukleoprotein 2 (Zinkfingerprotein Basonuclin2) Antikörper

BCL7C B-Zell-Leukämie / Lymphomprotein 7 Antikörper

BSCL2 Protein 2 Antikörper gegen angeborene Fettstoffwechselstörungen

BTG1 B-Zellen Migration Gen 1 Antikörper

BEAN1 Antikörper gegen das Protein BEAN1

Hinweis:

1, das Reagenz 2 ist ein Enzym, kann nicht gefriert werden und wird bei der Verwendung auf Eis gelegt.

2. Die Kontrolle braucht nur eine Röhre.

Wenn der Absorptionswert der Kontrollröhre größer als 2 ist, wird empfohlen, das Reagenz zweimal mit destilliertem Wasser zu verdünnen (10 μl Reagenz zweimal + 60 μl destilliertes Wasser).

Warum sind SOD-Proben größer als die Kontrollrohre, in welchem Bereich liegen die Werte der Kontrollrohre?

Der Bereich der Kontrollrohre ist 0,8-2. Zu niedrige Absorptionswerte im Kontrollrohr können (1) Reagenz II oder Reagenz IV nicht verfügbar sein; (2) keine Reagenzien in der Reihenfolge hinzugefügt werden; (3) Die Reaktionszeit ist nicht ausreichend, die Reaktionszeit kann verlängert werden (die Reaktionszeit kann von 30 Minuten auf 40 Minuten verlängert werden). Ein zu hoher Absorptionswert im Kontrollrohr kann das entsprechende Vielfache sein, dass Reagenz II nicht nach der Bedienungsanleitung verdünnt wurde.

Wenn das Messrohr größer ist als das Kontrollrohr, kann der Einfluss der Verunreinigungen in der Probe zu groß sein, um den Einfluss der Verunreinigungen zu verringern, wird die Probe in der Regel mit destilliertem Wasser oder Extraktflüssigkeit verdünnt, um die Messung normal zu machen. Berechnen Sie die Formel mit dem entsprechenden Verdünnungsvervielfachen.

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