Polymer D-Lysin (Molekulargewicht: 15-300.000) Kulturmedium

Poly-D-Lysin (Mw 150.000-300.000)

Polymer D-Lysin (Molekulargewicht: 15-300.000)

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Suchbegriffe:

Poly-L-Lysin (PLL) Poly-D-Lysin (PDL) Gelatine Gelatine; Kollagen Typ I Kollagen Typ I Fibronectin Fibrelin; Matrigel-Substratkleber; CAS：27964-99-4；

Produktinformationen:

Grundlegende Einführung:

Polylysin ist ein positiv geladenes Aminosäurepolymer, das sich an DNA, rote Blutkörperchen oder jedes negativ geladene Protein binden kann, und ist ein nicht spezifischer zellulärer Adhäsionsfaktor, der die Adsorption der Zelle an die Festphase fördert. Der Wirkungsmechanismus besteht darin, dass sie die elektrostatische Wechselwirkung von negativ geladenen Ionen auf der Zellmembranoberfläche und der Festphasenmatrisoberfläche (wie Zellpetrieschalen, Folien usw.) verstärken können. Wenn Polylysin an die Kulturoberfläche adsorbiert wird, erhöht es die Anzahl der cation-bindenden Stellen, die für die Zellbindung verwendet werden. Die Größe des Polylysin-Molekulargewichts hängt mit der Viskosität zusammen, d. h. niedrigeres Molekulargewicht, niedrigere Viskosität, je einfacher die Verwendung ist; Höheres Molekulargewicht, höhere Viskosität und mehr Haftstellen. Polylysin mit einem Molekulargewicht von > 30.000 eignet sich für die Förderung der Zellhaftung an der festen Matrix.

Es gibt zwei häufige Untertypen von Polylysin, Typ D und L. Da Polylysin ein nicht spezifischer Adhäsionsfaktor für die Zellbindung ist, können beide Untertypen als verpackte feste Matrix verwendet werden, die das Adhäsionswachstum der Zellen in Zellkulturen fördern. Es wird berichtet, dass Polymer L-Lysin die Haftung von Proteinen auf ELISA-Platten verbessern kann. In zellulären Anwendungen können jedoch bestimmte Zellen Polymer L-Lysin hydrolysieren. In diesem Fall muss Polymer D-Lysin als Adhäsionsfaktor verwendet werden, um die Zellen vor der Zerstörung durch die Aufnahme von übermäßigen L-Lysin zu schützen.

Dieses Produkt ist Poly-D-Lysin (Poly-D-Lysin), mit einem Molekulargewicht von 150.000-300.000, geeignet für die Zellkultur. Als Zellkultur-Matrix wird die empfohlene Menge verwendet: Für eine 25cm2 Platte benötigt man eine Polylysinlösung von 0,1 mg / ml von etwa 0,5 ml bis 1,0 ml. Dieses Produkt kann auch als Klebemittel für histologische Analysen verwendet werden.

Lagerung und Transport

Aufbewahrung: -20 ° C trocken aufbewahren, 3 Jahre stabil.

Transport: Eisbeuteltransport.

Hinweise

In einigen Zellkulturanwendungen verdauen einige Zellen Polymer L-Lysin und absorbieren es, und die Zufuhr von Polymer L-Lysin kann eine gewisse Zytotoxizität verursachen. Daher wird empfohlen, Poly-D-Lysin zu verwenden, wie Poly-D-lysine (Mw 150,000-300,000)（#MX0922）。

2. Dieses Produkt wird in Form von Bromhydratsäure (HBr) zur Verfügung gestellt, wenn Sie Bromhydratsäure in diesem Produkt entfernen möchten, können Sie dieses Produkt in einem neutralen Puffer lösen und die Salzionen durch Dialyse entfernen.

3. Für Ihre Sicherheit und Gesundheit tragen Sie bitte experimentelle Anzüge und Einweghandschuhe.

Gebrauchsanweisung

1. Vorbereitung der Speicherflüssigkeit

Nach dem vollständigen Lösen von 10 mg Pulver in 2 ml sterilem Deionisierungswasser mit 0,2 μm Proteinarm-adsorbiertem Filterfilm nach der Sterilisierung erhält man 5 mg / ml Poly-D-Lysin-Speicherflüssigkeit, die direkt für Zellkulturzwecke verwendet werden kann. Um die Verschmutzung durch mehrfache Verwendung aufrechtzuerhalten, kann die Speicherflüssigkeit in einem sterilen Rohr in einer einmaligen Menge aufgeteilt werden, bei 4 ° C oder -20 ° C aufbewahrt werden, die mindestens 1 Jahr gültig ist.

2. Zellkultur Paket ist Matrix

Tests mit Polymer-D-Lysin für zellbezogene Pakete erfordern die Optimierung der Paketbedingungen nach verschiedenen Zelllinien und Anwendungen. Die allgemeinen Schritte sind wie folgt:
1) Verwenden Sie steriles Gewebekulturwasser oder PBS, um 5 mg / ml Poly-D-Lysin-Speicherflüssigkeit auf eine Packungskonzentration zu verdünnen, die für Ihr eigenes Experimentssystem geeignet ist. In der Regel werden die häufig verwendeten Petrischalen / Plattenpackungen mit einer Konzentration von 0,1 mg / ml verwendet, kurz nach einer 50-fachen Verdünnung der Speicherflüssigkeit.

2) sterile Bedingungen verpackt durch Zellkulturplatte, die Menge 0,5 ml-1,0 ml / 25 cm2 verwendet. Schütteln Sie den Boden sanft, damit er die gesamte Platte bedeckt.

3) 5 Minuten später entfernen Sie die Plattenoberflächenlösung mit einer Pistole und waschen Sie die Platte mit sterilem Gewebekulturwasser oder PBS; [Hinweis]: Manche Fälle dauern 1 bis 2 Stunden, um die Platte zu fertigen, manchmal brauchen Sie eine Übernachtung. Je nach Situation.

4) Nach mindestens 2 Stunden Trocknung können Zellkulturen durchgeführt werden.

[Hinweis]: Wenn das Polylysin-Paket nach dem Glas oder die Folie sterilisiert werden muss, können sie mit Gamma-Strahlung (anstatt Hochdrucksterilisierung) sterilisiert werden.

[Hinweis]: Wenn die Oberfläche des Pakets ungleich ist, können Sie die Glasträger 2-3 h mit 1mM Magnesiumacetat vorbehandeln und die Packung gründlich reinigen. Alternativ werden die Glasträger mit Säure (Salzsäure oder Schwefelsäure) gereinigt, wodurch die Polylysinlösungspakete sehr glatt werden können.

3. Histologische Forschung (Folienpackung)

Im Allgemeinen wird eine Poly-D-Lysin-Lösung von 0,1% (w/v) für die Herstellung von histologischen Folien empfohlen. Nach 5 Minuten mit einer entsprechenden Polylysinlösung reinigen und über Nacht bei Raumtemperatur trocknen oder etwa 1 Stunde im Ofen bei ca. 60 ° C trocknen. [Hinweis]: Diese Arbeitslösung wird in einer Plastikflasche bei 4 ° C gelagert und auf 4 Mal eingeschränkt.

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Geschrieben/Bearbeitet von V. Shallan

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