Intermediate Leberzellen von Ratten

Versuchsbericht:

Trennung und Kultivierung:

Entfernen Sie unter sterilen Bedingungen das atriale Gewebe von Ratten im Alter von 1-3d SD und waschen Sie diesen Gewebeblock zweimal mit PBS und schneiden Sie das Gewebe in eine Größe von etwa 1 mm 3;

4 ml Enzymverdauung (0,1% und 0,1% Kollagen Typ I) in den Gewebeblöcken hinzufügen, 10s vermischen, 10 min unter 37 ° C verdauen lassen, anschließend mit einem Tropfenschlag zu einer Einzelzellsuspension geblasen, natürlich ausfällen und das Klar sammeln, nach 4 ° C mit 10% FBS-Medium zur Beendigung der Verdauung platziert;

3, das restliche Gewebe 3 bis 4 ml enzymatische Verdauungslösung hinzufügen, 10s mischen, 37 ° C nach 10 min Verdauung setzen, nach der oben genannten Methode sammeln und 4 ° C nach der Verdauung beenden, wiederholen Sie diesen Schritt 2-3 Mal, bis das Gewebe verdaut wird;

4, mit 200 Mesh Edelstahl Sieb Filter Zell Verdauungsflüssigkeit, 1200r / min Zentrifuge 10min, entfernen Sie die obere Reinigung, sedimentierte Zellen mit einem 10% FBS DMEM / F12-Medium gemischt, in einer 25cm2-Kulturflasche impft, in 37 ° C, 5% CO2-Kultivkammer platziert;

5, nach 1 Stunde der Differenz-Klebung, saugen Sie das Medium aus und impfen Sie in einer 6-Loch-Platte nach den experimentellen Bedürfnissen, um die Kultur fortzusetzen;Immunfluorescenzprüfung:

1, warten Sie auf das Wachstum der atrialen Muskelzellen auf 80% Fusion, entfernen Sie das Medium, spülen Sie die Zellen zweimal mit PBS, je 10 Minuten, und fixieren Sie die Zellen mit 4% Polyformaldehyde bei Raumtemperatur für 15 Minuten;

Spülen Sie die Zellen mit PBS zweimal, jeweils 10 min, und dann mit 0,1% Triton X-100-Membran für 15 min unter 4 ° C-Bedingungen;

Spülen Sie die Zellen mit PBS zweimal, jeweils 10 Minuten, und schließen Sie die Zellen mit 4% BSA für 30 Minuten bei Raumtemperatur;

Verdünnen Sie alpha-Actin im Verhältnis von 1: 100 und legen Sie es dann über Nacht in einem 4 ° C Kühlschrank, um die Zellen zu inkubieren;

5, PBS spülen Sie die Zellen dreimal, jeweils 10 min, verdünnen Sie die Anti-α-Aktin-Resistenz im Verhältnis von 1: 150, 1 h unter 37 ° C;

Spülen Sie 3 Mal mit PBS, jeweils 10 Minuten, beobachten Sie das Bild unter dem umgekehrten Fluoreszenzmikroskop und fotografieren Sie es.

Zellen Einführung:

Die Leber ist eine große Drüse im menschlichen Körper und ein großes materielles Organ. Intermediate Leberzellen gehören zu erwachsenen Stammzellen, und Studien haben gezeigt, dass sie sich in Knochen, Knorpel, Sehnen, Fett usw. differenzieren können. Die Differenzierung von erwachsenen Stammzellen zu Muskelzellen macht viele Muskeldegenerative und genetische mehr eine bessere Wahl.

Zelleigenschaften:

1） Das Gewebe stammt aus normalem Lebergewebe von Versuchstieren.

2)Zellendifizierung:CD44Fluoreszenzfärbung ist positiv.

3)Identifizierte Zellreinigkeit höher als90%.

4)Nicht enthaltenHIV-1undHBVundHCVdie Hefe, die Hefe und.

5)Zellwachstumsmethode: Langschnappform, unregelmäßige Zellen, Wandkultur.

Empfohlenes Medium:

Wir empfehlen die VerwendungDelfOriginal Zwischenraum Zellen Ausbildungssystem Als in vitro kultiviertes Medium.

Hinweis:

1. Nach dem Empfang der Zellen zuerst beobachten, ob die Zellflasche intakt ist, ob die Kulturflüssigkeit Leckage, Trübe und andere Phänomene hat, wenn das obige Phänomen auftritt, kontaktieren Sie uns bitte rechtzeitig.

2. Lesen Sie die Zellanleitung sorgfältig und verstehen Sie die zellbezogenen Informationen, wie die Zellmormologie, das verwendete Kulturmedium, das Serumverhältnis, die erforderlichen Zytokinen usw., um sicherzustellen, dass die Zellkulturbedingungen konsistent sind, wenn aufgrund der Inkonsistenz der Kultivbedingungen die Zellen zu Problemen führen, trägt der Kunde die Verantwortung selbst.

Die Oberfläche der Zellflasche mit 75% Alkohol wischen und den Zustand der Zelle unter dem Mikroskop beobachten. Aufgrund von Transportproblemen sind einige Zellen aufgrund von Temperaturänderungen und heftigen Kollisionszerstörungen ein normales Phänomen. Nach der Beobachtung des guten Zellstands, 75% Alkohol desinfizierte Flaschenwand T25 Flasche in 37 ° C-Kammer für 4-6 h platziert.

4. Klebstoffzellen können verdaut werden, die suspendierten Zellen direkt gemischt, um die Zellen zu sammeln, 900 rpm-1000 rpm 3 min zentrifugieren und auflösen. Fügen Sie 5 mL PBS resuspendierte Zellen, dann 900 rpm-1000 rpm Zentrifugieren für 3 min, resuspendieren Sie die Zellen mit frischem * Medium und impftieren Sie in eine neue Flasche oder Petrischale und legen Sie sie in einem Kühlraum für die Kultivierung.

5. Bitten Sie den Kunden, ein Medium unter den gleichen Bedingungen für die Zellkultur zu verwenden.

Es wird empfohlen, dass der Kunde in den ersten 3 Tagen nach Erhalt der Zelle ein paar Zellfotos aufnimmt, um den Zellstand aufzuzeichnen und die Kommunikation mit unserer technischen Abteilung zu erleichtern. Wenn einzelne empfindliche Zellen aufgrund des Transports instabil sind, wenden Sie sich bitte rechtzeitig an uns, um die spezifische Situation der Zelle zu informieren, damit unsere Techniker den Rückzug verfolgen können, bis das Problem gelöst ist.

Die Zelle dient ausschließlich der wissenschaftlichen Verwendung.

8. Hinweis: Das Transportmedium (Irrigationsmedium) kann nicht mehr verwendet werden, um Zellen zu kultivieren, bitte ersetzen Sie es mit einem neuen * Medium, das gemäß den Bedingungen der Anleitung für die Zellkultur entwickelt wurde, um Zellen zu kultivieren. Empfangen der Zellen nachfolgende Generation empfiehlt 1: 2-Generation.

Hinweis: Die 1: 2-Übertragung bedeutet, dass eine T25-Flasche 2 T25-Flaschen oder 2 6cm-Schalen überträgt. Nicht 1 T25 Flasche 2 10cm Teller übertragen.

Produkte, die das Unternehmen verkauft:

Elnelisakit

Ratte Orphan Peptide(OFQ/N)elisaAnalytische Testkits

OFQ/N ELISA Kit

Schweineball ProteinG(IgG)ElisaAnalytische Testkits

IgGELISAKit

Topform Erdnusslektin Fluoreszenzmarker (PNA-FITC(Färbungskit)

Ratten frei β-Kapillarität(f-βCG)ElisaTestkits

Gen veränderter MaisTC1507Gentests Kit

Mäuse α1Zuckerprotein(α1-AGP)ElisaTestkits

Affenlaktin(PRL/LTH) ElisaAnalytische Testkits

PRL/LTH ELISA Kit

Humane DihydropyramidaseNr. 2 (dpysl 2) ELISAAnalytische Testkits

Dpysl 2 Alises

Adenin-Dinukleotid(NADH)ElisaTestkits

Rattenblastenase3(CASP3)ElisaTestkits

Zellacetonsäure-Kinase (PKQuantitative Testkits zur Gesamtaktivität

Menschliche Zuckerrezeptoren(MR)ElisaAnalytische Testkits

MOSPD3Protein Antikörper

MOSPD3

1Chromosome Nr. offene Lesebox95Antikörper

C1ORF95

Transkriptionsfaktorder E3 Anti-TFE3

Ribosomebindendes Protein1Antikörper Anti-RRBP1

Nukleoproteine3Antikörper Anti-Nukleolares Protein 3/Apoptosenrepressor mit CARD

3Rezeptor-Antikörper Antivitamin-D-Rezeptor / VDR

Cy5Markiert Kaninchen gegen HühnerIgG H&L

Ratten Beta-Interferon(IFN-β/ IFNB) ElisaAnalytische Testkits

IFN-β/ IFNB ELISA Kit

Kernfaktor κBInhibitor-Kinase α(IKK-αElisaAnalytische Testkits

Intermediate Leberzellen von RattenMensch...αÜberzeugend.