Knochenmembranstammzellen von Ratten

Zellen Einführung:

Die Knochenmembran ist eine Schicht von Bindegewebe, die die Knochenoberfläche bedeckt. Die Knochenmembrane, die über die Hypoderma-Fasern an den Knochen verankert ist, fungiert als Verbindungsbrücke zwischen äußerem Muskelgewebe und innerem Knochen, eine Struktur, die dazu beiträgt, die Integrität der Knochenmembrane aufrechtzuerhalten.

Die Knochenmembran besteht aus zwei Teilen, einer äußeren porösen Faserschicht und einer dichten inneren Zellschicht, in der die Faserschicht fibrogene Zellen, Kollagen-Fasern, elastische Fasern und Mikrotuben enthält. In der Zellschicht sind die meisten Knochenmembranstammzellen vorhanden, die ähnlich wie die mesoclimalen Stammzellen aus dem Knochenmark sind und ein vielfältiges Differenzierungspotenzial haben.

Knochenreparation, Umformung und Erneuerung sind eng mit den Stammzellen in der Knochenmembran verbunden. Unter normalen physiologischen Bedingungen spielt das Knochenmembrangewebe die Rolle der Erneuerung und Umformung der Knochen aufrechtzuerhalten, wobei sich die Stammzellen sowohl in Knochenzellen durch intramembrane Knochenbildung als auch in Knorpelzellen durch Knorpelbildung differenzieren können.

Zellen Eigenschaften：

1） Die Zellen stammen aus normalem Gelenkmembrangewebe von Versuchstieren.

2)Zellendifizierung:CD90oderCD73Fluoreszenzfärbung ist positiv.

3)Identifizierte Zellreinigkeit höher als90%.

4)Nicht enthaltenHIV-1und HBVundHCVdie Hefe, die Hefe und.

5)Zellwachstum: fibrogene Zellen, Wandkultur.

Empfohlenes Medium:

Wir empfehlen die VerwendungDelfOriginal Oberhaut Zellkultursystem Als Kulturreagens für die Zelle.

Versuchsbericht:

Trennung und Kultivierung:

Entfernen Sie unter sterilen Bedingungen das atriale Gewebe von Ratten im Alter von 1-3d SD und waschen Sie diesen Gewebeblock zweimal mit PBS und schneiden Sie das Gewebe in eine Größe von etwa 1 mm 3;

4 ml Enzymverdauung (0,1% und 0,1% Kollagen Typ I) in den Gewebeblöcken hinzufügen, 10s vermischen, 10 min unter 37 ° C verdauen lassen, anschließend mit einem Tropfenschlag zu einer Einzelzellsuspension geblasen, natürlich ausfällen und das Klar sammeln, nach 4 ° C mit 10% FBS-Medium zur Beendigung der Verdauung platziert;

3, das restliche Gewebe 3 bis 4 ml enzymatische Verdauungslösung hinzufügen, 10s mischen, 37 ° C nach 10 min Verdauung setzen, nach der oben genannten Methode sammeln und 4 ° C nach der Verdauung beenden, wiederholen Sie diesen Schritt 2-3 Mal, bis das Gewebe verdaut wird;

4, mit 200 Mesh Edelstahl Sieb Filter Zell Verdauungsflüssigkeit, 1200r / min Zentrifuge 10min, entfernen Sie die obere Reinigung, sedimentierte Zellen mit einem 10% FBS DMEM / F12-Medium gemischt, in einer 25cm2-Kulturflasche impft, in 37 ° C, 5% CO2-Kultivkammer platziert;

5, nach 1 Stunde der Differenz-Klebung, saugen Sie das Medium aus und impfen Sie in einer 6-Loch-Platte nach den experimentellen Bedürfnissen, um die Kultur fortzusetzen;Immunfluorescenzprüfung:

1, warten Sie auf das Wachstum der atrialen Muskelzellen auf 80% Fusion, entfernen Sie das Medium, spülen Sie die Zellen zweimal mit PBS, je 10 Minuten, und fixieren Sie die Zellen mit 4% Polyformaldehyde bei Raumtemperatur für 15 Minuten;

Spülen Sie die Zellen mit PBS zweimal, jeweils 10 min, und dann mit 0,1% Triton X-100-Membran für 15 min unter 4 ° C-Bedingungen;

Spülen Sie die Zellen mit PBS zweimal, jeweils 10 Minuten, und schließen Sie die Zellen mit 4% BSA für 30 Minuten bei Raumtemperatur;

Verdünnen Sie alpha-Actin im Verhältnis von 1: 100 und legen Sie es dann über Nacht in einem 4 ° C Kühlschrank, um die Zellen zu inkubieren;

5, PBS spülen Sie die Zellen dreimal, jeweils 10 min, verdünnen Sie die Anti-α-Aktin-Resistenz im Verhältnis von 1: 150, 1 h unter 37 ° C;

Spülen Sie 3 Mal mit PBS, jeweils 10 Minuten, beobachten Sie das Bild unter dem umgekehrten Fluoreszenzmikroskop und fotografieren Sie es.

Produkte, die das Unternehmen verkauft:

Hepatin bei Ratten(HS)Testkit, englischer Name:HS ELISA Kit

Mausinselzell-aibody (ICA) ELISA-KitMaus Insel Zell Antikörper(ICA)Testkits

Rathitzeschockprotein60,hSP-60ELISAKitRatten Hitzeschock Protein60 (Hsp-60)Testkits96T / 48TImportaufteilung

Sehen wir mal.Rattengranuläre Kolonialstimulationsfaktoren

Zellgalactylacetat Transaminase(GOT)Quantitative Testkits mit Aktivspektrospektrum20Mal

Raetinol-bindendes Protein, RBPELISAKitRatten binden Proteine(RBP)Spezifikationen des Testkits:96T / 48T

FCGR2ARestrukturieren der KrabbenfresserCD32a / FCGR2AProteinProtein

MrpL28 (mitochondriales Ribosomalprotein L28) 0,5 mg MrpL28 (mitochondriales Ribosomalprotein L28)Mitochondriale RibosomenproteineL28(Antigen)

BLMHUmstrukturierenBLMH / BLM HydrolaseProteinProtein

EPDR1 Protein MenschUmstrukturierenEPDR1Protein

TF Protein MausReorganisation der MäuseTransferrin / CD176 / SerotransferrinProteinFcEtikett)

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Maus-Matrix-Zell-Derivativen1βSDF-1β/ CXCL 12) ELISAReagenzkist96T / 48T

Human Salmonella typhi aigen (St-Ag) ELISA KitMenschliches Typhus Antigen(St-Ag)Testkits

Wir werden Insolvenz bis 1, lmp- 1 elisattractionMenschliches latentes Membranprotein1 (LMP-1)Testkits96T / 48TImportaufteilung

Humanai-Glykoproteinkörper, GPTestkits für menschliche Anti-Glukoprotein-Antikörper(GP)Spezifikationen des Testkits:96T / 48T

Pflanzen hell(Leucin)Quantitative Testkits für Farbvergleich20Mal

HumanvisfatinELISAKitmenschliche Lipine/Innere Fette(Visfatin)Spezifikationen des Testkits:96T / 48T

Knochenmembranstammzellen von RattenMäuse DehydrogenaseE1(PDHE1)ELISACITE Elisa. 96T / 48T

Glykogensynthetase-Kinase bei Mäusen(GSK) Elisay Elisa. 96T / 48T

MäuseCXCChemo-Faktor-Ligande16 (CXCL 16) Eliste Elisa. 96T / 48T

Hochempfindliche Thyrogensäure bei Mäusen(u-T3)ELISAKit Elisa. 96T / 48T

Hinweis:

1. Nach dem Empfang der Zellen zuerst beobachten, ob die Zellflasche intakt ist, ob die Kulturflüssigkeit Leckage, Trübe und andere Phänomene hat, wenn das obige Phänomen auftritt, kontaktieren Sie uns bitte rechtzeitig.

2. Lesen Sie die Zellanleitung sorgfältig und verstehen Sie die zellbezogenen Informationen, wie die Zellmormologie, das verwendete Kulturmedium, das Serumverhältnis, die erforderlichen Zytokinen usw., um sicherzustellen, dass die Zellkulturbedingungen konsistent sind, wenn aufgrund der Inkonsistenz der Kultivbedingungen die Zellen zu Problemen führen, trägt der Kunde die Verantwortung selbst.

Die Oberfläche der Zellflasche mit 75% Alkohol wischen und den Zustand der Zelle unter dem Mikroskop beobachten. Aufgrund von Transportproblemen sind einige Zellen aufgrund von Temperaturänderungen und heftigen Kollisionszerstörungen ein normales Phänomen. Nach der Beobachtung des guten Zellstands, 75% Alkohol desinfizierte Flaschenwand T25 Flasche in 37 ° C-Kammer für 4-6 h platziert.

4. Klebstoffzellen können verdaut werden, die suspendierten Zellen direkt gemischt, um die Zellen zu sammeln, 900 rpm-1000 rpm 3 min zentrifugieren und auflösen. Fügen Sie 5 mL PBS resuspendierte Zellen, dann 900 rpm-1000 rpm Zentrifugieren für 3 min, resuspendieren Sie die Zellen mit frischem * Medium und impftieren Sie in eine neue Flasche oder Petrischale und legen Sie sie in einem Kühlraum für die Kultivierung.

5. Bitten Sie den Kunden, ein Medium unter den gleichen Bedingungen für die Zellkultur zu verwenden.

Es wird empfohlen, dass der Kunde in den ersten 3 Tagen nach Erhalt der Zelle ein paar Zellfotos aufnimmt, um den Zellstand aufzuzeichnen und die Kommunikation mit unserer technischen Abteilung zu erleichtern. Wenn einzelne empfindliche Zellen aufgrund des Transports instabil sind, wenden Sie sich bitte rechtzeitig an uns, um die spezifische Situation der Zelle zu informieren, damit unsere Techniker den Rückzug verfolgen können, bis das Problem gelöst ist.

Die Zelle dient ausschließlich der wissenschaftlichen Verwendung.

8. Hinweis: das Transportmedium (Irrigationsmedium) kann nicht mehr verwendet werden, um Zellen zu kultivieren, bitte ersetzen Sie es durch ein neues * Medium, das gemäß den Bedingungen der Anleitung zur Zellkultur entwickelt wurde, um Zellen zu kultivieren. Empfangen der Zellen nachfolgende Generation empfiehlt 1: 2-Generation.

Hinweis: Die 1: 2-Übertragung bedeutet, dass eine T25-Flasche 2 T25-Flaschen oder 2 6cm-Schalen überträgt. Nicht 1 T25 Flasche 2 10cm Teller übertragen.