Epiteliale Zellen von Ratten

Versuchsbericht:

Trennung und Kultivierung:

Entfernen Sie unter sterilen Bedingungen das atriale Gewebe von Ratten im Alter von 1-3d SD und waschen Sie diesen Gewebeblock zweimal mit PBS und schneiden Sie das Gewebe in eine Größe von etwa 1 mm 3;

4 ml Enzymverdauung (0,1% und 0,1% Kollagen Typ I) in den Gewebeblöcken hinzufügen, 10s vermischen, 10 min unter 37 ° C verdauen lassen, anschließend mit einem Tropfenschlag zu einer Einzelzellsuspension geblasen, natürlich ausfällen und das Klar sammeln, nach 4 ° C mit 10% FBS-Medium zur Beendigung der Verdauung platziert;

3, das restliche Gewebe 3 bis 4 ml enzymatische Verdauungslösung hinzufügen, 10s mischen, 37 ° C nach 10 min Verdauung setzen, nach der oben genannten Methode sammeln und 4 ° C nach der Verdauung beenden, wiederholen Sie diesen Schritt 2-3 Mal, bis das Gewebe verdaut wird;

4, mit 200 Mesh Edelstahl Sieb Filter Zell Verdauungsflüssigkeit, 1200r / min Zentrifuge 10min, entfernen Sie die obere Reinigung, sedimentierte Zellen mit einem 10% FBS DMEM / F12-Medium gemischt, in einer 25cm2-Kulturflasche impft, in 37 ° C, 5% CO2-Kultivkammer platziert;

5, nach 1 Stunde der Differenz-Klebung, saugen Sie das Medium aus und impfen Sie in einer 6-Loch-Platte nach den experimentellen Bedürfnissen, um die Kultur fortzusetzen;Immunfluorescenzprüfung:

1, warten Sie auf das Wachstum der atrialen Muskelzellen auf 80% Fusion, entfernen Sie das Medium, spülen Sie die Zellen zweimal mit PBS, je 10 Minuten, und fixieren Sie die Zellen mit 4% Polyformaldehyde bei Raumtemperatur für 15 Minuten;

Spülen Sie die Zellen mit PBS zweimal, jeweils 10 min, und dann mit 0,1% Triton X-100-Membran für 15 min unter 4 ° C-Bedingungen;

Spülen Sie die Zellen mit PBS zweimal, jeweils 10 Minuten, und schließen Sie die Zellen mit 4% BSA für 30 Minuten bei Raumtemperatur;

Verdünnen Sie alpha-Actin im Verhältnis von 1: 100 und legen Sie es dann über Nacht in einem 4 ° C Kühlschrank, um die Zellen zu inkubieren;

5, PBS spülen Sie die Zellen dreimal, jeweils 10 min, verdünnen Sie die Anti-α-Aktin-Resistenz im Verhältnis von 1: 150, 1 h unter 37 ° C;

Spülen Sie 3 Mal mit PBS, jeweils 10 Minuten, beobachten Sie das Bild unter dem umgekehrten Fluoreszenzmikroskop und fotografieren Sie es.

Zellen Einführung:

Die Konsolidation ist die äußere Schicht der Augenwand und besteht aus dichtem Kollagen und elastischen Fasern, deren Struktur fest und undurchsichtig ist. Der vordere Rand der Konsolidation verbindet sich mit dem Rand der Hornhaut und der hintere mit der Hardmembrane des Sehnervs.

Die Konsolidation ist von außen nach innen unterteilt in: die obere Schicht der Konsolidation; Hauptebene; Untere Konsolidation. Die obere Schicht besteht aus Epithelzellen.

Zelleigenschaften:

1） Das Gewebe stammt aus normalem Augengewebe von Versuchstieren.

2)Zellendifizierung: Breitspektrumkeratin(PCK)Fluoreszenzfärbung ist positiv.

3)Identifizierte Zellreinigkeit höher als90%.

4)Nicht enthaltenHIV-1undHBVundHCVdie Hefe, die Hefe und.

5)Zellwachstum: Epithelial, unregelmäßige Zellen, Wandkultur.

Empfohlenes Medium:

Wir empfehlen die VerwendungDelfOriginal Oberhaut Zellkultursystem Als in vitro kultiviertes Medium.

Hinweis:

1. Nach dem Empfang der Zellen zuerst beobachten, ob die Zellflasche intakt ist, ob die Kulturflüssigkeit Leckage, Trübe und andere Phänomene hat, wenn das obige Phänomen auftritt, kontaktieren Sie uns bitte rechtzeitig.

2. Lesen Sie die Zellanleitung sorgfältig und verstehen Sie die zellbezogenen Informationen, wie die Zellmormologie, das verwendete Kulturmedium, das Serumverhältnis, die erforderlichen Zytokinen usw., um sicherzustellen, dass die Zellkulturbedingungen konsistent sind, wenn aufgrund der Inkonsistenz der Kultivbedingungen die Zellen zu Problemen führen, trägt der Kunde die Verantwortung selbst.

Die Oberfläche der Zellflasche mit 75% Alkohol wischen und den Zustand der Zelle unter dem Mikroskop beobachten. Aufgrund von Transportproblemen sind einige Zellen aufgrund von Temperaturänderungen und heftigen Kollisionszerstörungen ein normales Phänomen. Nach der Beobachtung des guten Zellstands, 75% Alkohol desinfizierte Flaschenwand T25 Flasche in 37 ° C-Kammer für 4-6 h platziert.

4. Klebstoffzellen können verdaut werden, die suspendierten Zellen direkt gemischt, um die Zellen zu sammeln, 900 rpm-1000 rpm 3 min zentrifugieren und auflösen. Fügen Sie 5 mL PBS resuspendierte Zellen, dann 900 rpm-1000 rpm Zentrifugieren für 3 min, resuspendieren Sie die Zellen mit frischem * Medium und impftieren Sie in eine neue Flasche oder Petrischale und legen Sie sie in einem Kühlraum für die Kultivierung.

5. Bitten Sie den Kunden, ein Medium unter den gleichen Bedingungen für die Zellkultur zu verwenden.

Es wird empfohlen, dass der Kunde in den ersten 3 Tagen nach Erhalt der Zelle ein paar Zellfotos aufnimmt, um den Zellstand aufzuzeichnen und die Kommunikation mit unserer technischen Abteilung zu erleichtern. Wenn einzelne empfindliche Zellen aufgrund des Transports instabil sind, wenden Sie sich bitte rechtzeitig an uns, um die spezifische Situation der Zelle zu informieren, damit unsere Techniker den Rückzug verfolgen können, bis das Problem gelöst ist.

Die Zelle dient ausschließlich der wissenschaftlichen Verwendung.

8. Hinweis: das Transportmedium (Irrigationsmedium) kann nicht mehr verwendet werden, um Zellen zu kultivieren, bitte ersetzen Sie es durch ein neues * Medium, das gemäß den Bedingungen der Anleitung zur Zellkultur entwickelt wurde, um Zellen zu kultivieren. Empfangen der Zellen nachfolgende Generation empfiehlt 1: 2-Generation.

Hinweis: Die 1: 2-Übertragung bedeutet, dass eine T25-Flasche 2 T25-Flaschen oder 2 6cm-Schalen überträgt. Nicht 1 T25 Flasche 2 10cm Teller übertragen.

Produkte, die das Unternehmen verkauft:

Ratten Darm Fettsäure Bindungsprotein(iFABP)ElisaTestkits

Acetylierungsanalytische Reagenzien

Maus Weiß Intermedian4(IL-4)ElisaAnalytische Testkits

Monodehydrogene Ascorbinsäurereduktase (MDHAR(Testbox)

ZellenCYP2B1Proteinexpression Fluoreszenz Quantitative Testkit

Reinigungslysosomen-funktionell neutrales rotes Testkit

大鼠整合素α6 (ITG)α6)ElisaTestkits

Stuhlverletzungen (Salmonella TyphiQualitative genetische Testkits

Mäuse Beta-Lactaminase-Inhibitoren(BLI) ElisaKostenloser Test des Testkits

BTB/POZStrukturdomänenproteine19AntikörperBTBD19

CD43Monoklonale AntikörperCD43

Natriumpeptid-RezeptorenCMonoklonale AntikörperNatriuretischer Peptidrezeptor C

PhosphorylationBehinderte 1AntikörperPhospho-Dab1 (Ser491)

γ-Glutamintransferpeptidase2SchwerkettenintikörperGGT2 schwere Kette

Weißes Interfen1Empfänger1AntikörperIL-1R1

ZytochromeP450 2C18AntikörperCYP2C18

Zellzyklus-Protein-abhängige Kinase-Inhibitoren2CAntikörperCDKN2C/p18 INK4c

LKalziumkanalproteineA1Untertyp6AntikörperCACH6/Cav2.3

MSI2Protein AntikörperMSI2

Monoklonale Antikörpermenschliches Fibrinogen

Proteine der Lösungsträgerfamilie38Mitgliederder A8AntikörperDer SLC38A9

Hodenspezifisches Ankerprotein1AntikörperANKMY1

Knochenform Protein9AntikörperBMP9

Lipase Reifenfaktor1AntikörperLMF1

Cyclin-abhängige Kinase8AntikörperCDK8

Hefe ZellzyklusMSchritt (SYNCHRONIE(Behandlungs-Kit)

KIAA1614Protein Antikörper

KIAA1614

ATP5EProtein Antikörper

Epiteliale Zellen von RattenATP5E