Humane M2-Typ-Acetonsäure-Kinase (PKM2) recombinantes Protein

MenschM2-Typ Acetonsäure-Kinase (PKM2) recombinantes Protein

Produktname:M2-Typ Acetonsäure-Kinase (PKM2) recombinantes Protein

Englischer Name:Rekombinante Pyruvatkinase-Isozyme M2 (PKM2)

M2PK; PKM; M2-PK; PKM1; CTHBP; OIP3; PK3; PKM; TCB; THBP1; Muskelisozym Pyruvatkinase; Schilddrüsenhormonbindendes Protein 1; zytosolisches Schilddrüsenhormonbindendes Protein; Pyruvat Kinase, Muskel

Modell:CS-D233

Enzyme und Kinase

Tumor Immunität

Arten:Homo sapiens (Mensch)

Quelle: Original Expression

GastgeberE. coli

Endotoxinspiegel:< 1,0 EU/μg (LAL-Messung)

Subzellpositionierung: Zellkern, Zytoplast

Vorhersage des Molekulargewichts:13,4 kDa

Wirkliches Molekulargewicht:13 kDa (Differentialanalyse siehe Anleitung)

Fragmente und Etiketten:Lys141~Ala248 mit N-Terminal Sein Tag

Pufferbestandteil:20 mM Tris, 150 mM NaCl Puffer (pH 8,0, enthält 1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0,01 % SKL, 5 % Trehalose und Proclin300)

Eigenschaften: Gefriertrocknetes Pulver

Reinheit:> 97%

Wartezeit:5.4

Anwendung:Positive Kontrolle; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

Spezifikationen:10μg50μg200μg1mg5mg

Protein Methoden / Schritte:

1, wo Kohlenwasserstoff in Kohlendioxid oxidiert wird und Wasser entflieht, wird Stickstoff in Proteinen in Ammoniak umgewandelt und Schwefelsäure verbindet, um Schwefelsäure-Chlor in Schwefelsäure zu erzeugen, dann wird Alkali destilliert, so dass Ammoniak entflieht, mit Borsäure absorbiert und dann mit Schwefelsäure- oder Salzsäure-Standardlösung titriert wird. Abhängig vom Säureverbrauch multipliziert mit dem Umwandlungskoeffizienten für den Proteingehalt. Aus langjähriger Erfahrung glaube ich,
Bei der Prüfung sollten die folgenden drei Aspekte berücksichtigt werden. 1. Kontrolle der Menge an Proben und Reagenzien.
Die Menge der Probe hängt von der hohen und niedrigen Menge an Proteinen in der Probe ab. Der Stickstoffgehalt in Proteinen ist konstant und wird in der Regel durch Messung des Stickstoffgehalts in Lebensmitteln bestimmt. Normalerweise werden feste Proben 0,2-2,0 g gewogen, halbfeste Proben 2-5 g gewogen und flüssige Proben 10-20 ml aufgenommen. Wenn der Stickstoffgehalt in der Probe niedrig ist, kann die Probenmenge erhöht werden.
Die Menge an Schwefelsäure wird in der Regel 20 ml hinzugefügt, aber wenn die Probenvolumen mehr als 5 g sind, sollte die Menge an Schwefelsäure im Verhältnis zu 5 ml pro Gramm Probe erhöht werden. Ansonsten führt die Verdauung der Probe nicht zu niedrigen Ergebnissen. 3. Zugabe von Schaumstoffen. Nahrungsmittel, die viel Fett oder Zucker enthalten, erzeugen bei der Verdauung eine große Menge an Schaum, der außerhalb der Flasche fließt und Stickstoffverlust verursacht. Daher können Sie vor der Verdauung eine kleine Menge an Schaumdämpfer hinzufügen. Zum Beispiel flüssiges Paraffin, Siliziumschaumdämmer usw.
4. Die Menge des Katalysators muss für Kupfersulfat geeignet sein, der Katalysator ist, die Wirkung ist gut, der Preis ist billig, die Umweltverschmutzung ist gering, und es ist ein Indikator für die Destillation mit Alkali. Kaliumsulfat kann den Abbau von organischen Stoffen beschleunigen und den Siedepunkt der Schwefelsäure von 34,0 ° C auf mehr als 40,0 ° C erhöhen, aber die Menge kann nicht zu groß sein, sonst wird die Temperatur zu hoch sein, um Ammoniumsalz aufzubauen - Huihiming verursacht Verluste, außer Kaliumsulfat Natriumsulfat hat die gleiche Wirkung. Schwierig verdaubare Proben können auch angemessen mit einer kleinen Menge Wasserstoffperoxid, Natriumhypochlorat und anderen Oxidationsmitteln zur Beschleunigung der Oxidation organischer Stoffe hinzugefügt werden.

5. 2. Probenverwertung. 1. Die Probe muss in eine trockene Kessel-Flasche verschoben werden, sonst ist die Probe leicht an der Flaschenwand festkleben und nicht leicht verdaulich. Beim Zugabe von Schwefelsäure sollte das Pulver, das an der Flaschenwand befestigt ist, sorgfältig in die Flasche gewaschen werden, damit die Probe vollständig verdaut wird. Es gibt auch Aufmerksamkeit auf die Verdauung, um die K-Flasche zu drehen, um die Kohlenstoffpartikel, die an der Flaschenwand befestigt sind, mit kondensierter Säure abzuspülen, um die Verdauung zu fördern. 2. Nachdem die Probe und das Reagenz geschüttelt wurden, sollte die Flaschenmünde einen kleinen Trichter platziert werden und die Flasche 45 geneigt werden. Winkel schräg auf das Asbestnetz mit kleinen Löchern, vorsichtig erwärmt, um Spritzen zu vermeiden. Warten Sie, bis die Probe in der Flasche vollständig kohlend ist, nachdem der Schaum gestoppt ist, verstärken Sie die Feuerkraft und halten Sie die Flüssigkeit in der Flasche mikrokochend, bis die Flüssigkeit eine halbe Stunde lang klar blau-grün ist und die Probe verdaut wird. Kontrolle der Bedingungen während des Destillationsprozesses.

Hinweise zum Proteinexperiment:

1. Probenbehandlung:

Probenahme, Lagerung und Behandlung von Proben müssen so reguliert werden, dass ein Gefrierschmelzungszyklus vermieden wird. Verunreinigung der Probe zu verhindern und die Reinheit der Probe aufrechtzuerhalten.

2. Probenteilung und Vorbereitung:

Verwenden Sie geeignete Trennungsmethoden wie SDS-PAGE oder Flüssigchromatografie. Halten Sie Geräte und Reagenzien sauber und vermeiden Sie Verschmutzung.

3. Kennzeichnung und Standardisierung:

Wählen Sie die geeignete Proteinmarketing-Methode, um die Markierungseffizienz und Stabilität zu gewährleisten.

4. Massenspektrumanalyse:

Stellen Sie sicher, dass die Kalibrierung und Leistung von Massenspektrometern und anderen zugehörigen Geräten im Zustand sind und dass die Bedingungen für die Massenspektrometrie konsistent sind

Datenverarbeitung und Analyse:

Spitzenextraktion, Massenspektrumkalibrierung und Proteinquantifizierung werden sorgfältig mit professionellen Werkzeugen durchgeführt. Analysieren Sie Daten mit statistischen Methoden und korrigieren Sie mehrere Hypothesen.

Technische Wiederholung und Qualitätskontrolle:

Technische Wiederholungen durchführen, einschließlich der positiven und negativen Kontrollgruppe. Sicherstellung der Genauigkeit und Wiederholbarkeit der Experimente.

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