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Gebäude 24, Straße 1661, Jiading, Shanghai
Shanghai Palaco Biotechnologie Co., Ltd.
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Dieses Kit ist nur für die Forschung zur Verfügung gestellt, das Unternehmen Labor bietet kostenlose Proben, 7 Arbeits-Sonnenaufgang-Ergebnisse, Rohdaten!
| Produktname | Spezifikation | Prüfmethoden | Warennummer |
| Coenzym I NAD(H) Gehalt Testbox-Spurmethode | 100 Röhre / 48 | Spurmethode | BK-S01321 |
Produktvorstellung:
| Bedeutung bestimmen Coenzym I NAD (H) ist weit verbreitet in Tieren, Pflanzen, Mikroorganismen und Kulturzellen, NAD + ist der primäre Wasserstoffrezeptor der Glykoenzymlyse (EMP) und des Tricarbonsäure-Kreislaufs (TCA), der erzeugte NADH überträgt Elektronen an Sauerstoff über die Atemelektronenkette (ETC), während ATP synthetisiert wird, bildet eine große Menge an ROS, während NADH als NAD + regeneriert wird. Die Oxidationsreaktionen im Abbau der drei wichtigsten Stoffwechselstoffe Zucker, Fett und Protein erfolgen überwiegend durch dieses System. Höhe und Tiefe des NAD(H)-Gehalts und des NADH/NAD+-Verhältnisses können zur Bewertung der Stärke der Glykolyse und des TCA-Zyklus verwendet werden. Ein höheres Verhältnis von NAD(H) und NADH/NAD+ deutet darauf hin, dass die Zellen einen höheren Sauerstoffverbrauch atmen und sich in einem peroxidierten Zustand befinden. Darüber hinaus hemmt ein erhöhtes NADH/NAD+-Verhältnis auch die Glykolyse und den TCA-Zyklus. Darüber hinaus spielen NAD+ Abbauprodukte eine wichtige regulatorische Rolle bei der Zellsignalisierung, dem Stoffwechsel und der Genexpression. Bestimmungsprinzip Die Extraktion von NAD + und NADH in der Probe mit saurem und alkalischem Extrakt, NADH durch die Wasserstoffübertragung von PMS, reduziertes oxidiertes Thiazolblau (MTT) als Methylchan, Detektion von Absorptionswerten bei 570 nm; NAD + kann durch Ethanoldehydrogenase zu NADH reduziert werden und mit der MTT-Reduktionsmethode nachgewiesen werden. Eigene Geräte und Zubehör Sichtbares Spektrophotometer/Enzym-Calibrator, Tischzentrifuge, Pipette, Spuren-Quartz-Palette/96-Loch-Platte, Molen, Eis und destilliertes Wasser. |
Zusammensetzung und Zubereitung:
Extrakt: Flüssigkeit 100 ml x 1 Flasche, 4 ° C aufbewahren.
Reagenz 1: Flüssigkeit 5 ml x 1 Flasche, 4 ° C Lichtschutz aufbewahren.
Reagenz 2: Flüssigkeit 15 ml x 1 Flasche, 4 ° C aufbewahren.
Reagenz 3: Flüssigkeit 3 ml x 1 Flasche, 4 ° C aufbewahren.
Reagenz 4: Flüssigkeit 3 ml x 1 Flasche, 4 ° C aufbewahren.
Die Ergebnisse des Experiments beurteilen, dass ich einen guten Trick habe:
1. Die quantitativen Messungen berechnen den Gehalt der zu messenden Proben anhand der Standardkurve.
2. Der OD-Wert des Probenlochs ist größer als der negative Kontroll-OD-Wert + 2 ~ 3SD als Schwelle für ein positives Ergebnis.
3, mit P / N-Wert (positiver Bohr OD-Wert / negativer Bohr OD-Wert) größer oder gleich 2,1 als positiv, P / N-Wert kleiner als 2,1, aber größer als 1,5 als verdächtig, P / N kleiner als 1,5 als negativ.
4, ELISA-Kit-optische Qualifikationsmethode: Nach dem Hinzufügen des Substrats durch Enzymolyse und Beendigung der Reaktion beobachtet das bloße Auge die positive Lochfarbe deutlich tiefer als (das Wettbewerbsgesetz hell als) die negative Kontrolle, die Farbe der negativen Kontrolle näher ist, wird als negativ bestimmt.
Teilen Sie mit Ihnen die Klassifizierung und Anforderungen für häufig verwendete instabile Reagentien:
① Leicht flüchtige, niedrige Brennpunkt Reagenzien zu versiegeln, in einem Schatten, belüftet, weit von der Feuerquelle aufbewahren.
② Die Substanz, die mit Wasserdampf reagiert, muss versiegelt und fern von der Wasserquelle gespeichert werden.
Das Reagenz, das leicht mit Sauerstoff wirkt, sollte seine Feststoff- oder Kristalldichtung aufbewahren, nicht langfristig seine Wasserlösung, Schwefelsäure, Schwefelsäureleisung, Kalium, Natrium und weißes Phosphor in flüssiger dichter Form aufbewahren.
Die Substanz, die mit Kohlendioxid reagiert, muss dicht gehalten werden, und die entsprechende Lösung reagiert leichter als Feststoff, daher sollten Sie auf die dichte Aufbewahrung achten.
5. Leicht flüchtige oder selbstzerbrechende Reagenzien müssen versiegelt und an kühler Belüftung gelagert werden.
Betriebsschritte:
1. Vorbereitung der Probe:
a. Vorbereitung der Zellproben: Sammeln Sie die Zellen und waschen Sie sie 1-2 Mal mit 4 ° C oder Eisbad vorgekühlt PBS oder physiologisches Salzwasser. Fällung mit vorgekühltem Gewebezelllysat bei 4 ° C oder Eisbad (Glas-Homogenizer oder verschiedene gängige elektrische Homogenizer verwendet werden können). Anschließend wird die Slurmie bei 4 ° C zentrifugiert und als Probe aufgenommen.
b. Vorbereitung der Gewebeprobe: Die Gewebeprobe wird nach der Entfernung des Blutes mit physiologischem Salzwasser (0,9% NaCl, 0,16 mg/ml) durch das Tier geflüchtet. Entsprechend dem Verhältnis von 500-1000ul Gewebezelllösung pro 100mg, Homogenisierung bei 4 ° C oder Eisbad (Glas-Homogenizer oder verschiedene gängige elektrische Homogenizer verwendet werden können). Anschließend wird die Slurmie bei 4 ° C zentrifugiert und als Probe aufgenommen.
Die Proteinkonzentration wird mit dem BCA-Proteinkonzentrationstest-Kit (P1511) bestimmt. Normalerweise ist die durchschnittliche SOD-Vitalität in einer Zell- oder Gewebehomogen-Slurmprobe von 10-20 µg Protein etwa eine Vitalitätseinheit (die Unterschiede zwischen verschiedenen Zellen und Geweben sind relativ groß, dieser Vitalitätsbereich dient nur als vorläufige Referenz). Eine Menge von 20-100 µg Protein pro Probe ist in der Regel ausreichend für die nachfolgenden Tests vorbereitet.
e. Abhängig von der Proteinkonzentration und der erwarteten Proteinbenutzung wird die Probe mit dem in der Kit bereitgestellten SOD-Detektionspuffer angemessen verdünnt. Zum Beispiel muss die Leber von Mäusen in der Regel 10-100 Mal verdünnt werden. Die vorbereiteten Proben können im Eisbad aufbewahrt werden, wenn sie am selben Tag gemessen werden; Wenn die Messung am selben Tag nicht abgeschlossen werden kann, kann sie bei -70 ° C gefroren werden, aber es wird empfohlen, die Messung am selben Tag zu beenden.
2. Vorbereitung der Kits:
a. Zubereitung der WST-8-Enzym-Arbeitsflüssigkeit: Verwenden Sie die folgende Tabelle, um die angemessene Menge an WST-8-Enzym-Arbeitsflüssigkeit, basierend auf der Anzahl der zu prüfenden Proben (einschließlich der Standardprodukte), zuzubereiten, um die zubereitete WST-8-Enzym-Arbeitsflüssigkeit bei 4 ° C oder einem Eisbad zu bewahren, die am selben Tag verwendet werden können, empfohlen wird jedoch, soweit verfügbar.
Hinweis: Da die Menge der Enzymlösung geringer ist und sich leicht absetzt, muss beachtet werden, dass sie vor der Verwendung vorsichtig zentrifiziert wird und dann angemessen vermischt wird.
b. Zubereitung der Reaktionsanleitung: Die von der Kit bereitgestellte Reaktionsanleitung (40X) wird gelöst und im Verhältnis von 1 μl Reaktionsanleitung (40X) mit 39 μl SOD-Detektionspuffer verdünnt, das heißt, die Reaktionsanleitung. 4 ° C oder Eisbad aufbewahren, kann am selben Tag verwendet werden, aber es wird empfohlen, so gut wie möglich zu verwenden.
c. (Optional) SOD-Standard-Produkt-Vorbereitung: Sie müssen ein eigenes SOD-Standard-Produkt bereitstellen und das SOD-Standard-Produkt mit der in diesem Kit bereitgestellten Verdünnungslösung auf die folgenden Konzentrationen verdünnen: 20 U/ml, 10 U/ml, 5 U/ml, 2,5 U/ml, 1,25 U/ml, 0,625 U/ml. In der anschließenden Prüfung können jeweils 20 Mikroliter genommen werden und Referenzproben getestet werden. Beschreibung: Um den Rückgang der SOD-Enzymaktivität nach der Verdünnung zu vermeiden, sollten SOD-Standards jetzt verdünnt werden; Diese Kit für den Nachweis von SOD erfordert nicht SOD als Standardprodukt, aber SOD-Standardprodukt kann als positive Kontrolle oder als Referenz zur Quantifizierung von SOD-Aktivität verwendet werden.
AHA3 AHA3 Antikörper
Antikörper gegen Phospho-ATP1A1 (Ser23) Natriumphosphat und Kalium ATP-Protein a1
Phospho-ASK1 (Ser83) Phosphorylierung Apoptose Signal reguliert Kinase 1 Antikörper
AADACL1 Neutralester Hydrolyse 1 Antikörper
Astrocyte Antikörper
Aldolase A Antikörper
Antikörper gegen Annexin VI
Beta-Amyloid (25-35) Antikörper
Angiotensin I Antikörper
Adrenomedullin-Nebennieren-Myelin-Antikörper (N-End-20-Peptid)
Arfaptin 2 ADP-Ribochemikälfaktor-Bindungsprotein-2-Antikörper
AVPR2 Antikörper
ASC-Antikörper gegen Apoptose
Afadin Protein-bindender Antikörper
Antithrombin III 抗3抗体
Serumalbumin (3F4) Antikörper
Recombinant CUB and Zona Pellucida Like Domains Protein 1 (CUZD1) bekannt geworden.
C-Typ Lectin Domänenfamilie 11, Mitglied A (CLEC11A)
C-Typ-Lectin-Domänenfamilie 2, Mitglied C (CLEC2C)
Das rekombinante Dermokin (DMKN)
Dickkopf-verwandtes Protein 2 (DKK2)
Recombinant Discs, Large Homolog Associated Protein 5 (DLGAP5) bekannt geworden.
EGF-ähnliches Domänenprotein, Multiple 6 (EGFL6)
EGF-ähnliches Domänenprotein, Multiple 7 (EGFL7)
Enah/Vasp-ähnliches Protein (EVL)
FK506 Bindendes Protein wie Protein (FKBPL)
Coenzym I NAD(H) Gehalt Testbox-SpurmethodeFMS wie Tyrosinkinase 3 (Flt3)
Recombinant GATA Binding Protein 3 (GATA3) bekannt geworden.
GATA-Bindungsprotein 4 (GATA4)
Recombinant G Protein Coupled Receptor, Familie C, Gruppe 5, Mitglied A (GPRC5A)
HtrA肽酶1 (HTRA1) 重组蛋白 Rekombinante HtrA Serinpeptidase 1 (HTRA1)
Recombinant HtrA Serin Peptidase 4 (HTRA4)