VMRC-LCD menschliche nicht-kleinzellige Lungenkrebszellen

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Zellen grundlegende Eigenschaften $r$n Zellname VMRC-LCD menschliche nicht-kleine Zellen Lungenkrebs Zellen $r$n Zellen Alias VMRC-LCD$r$n Artikelnummer XY-H1034$r$n Gattung Quelle menschliche$r$n Gewebe Quelle Lunge$r$n Wachstumsmerkmale Adhesive Wachstum$r$n Zellmormologie Epitheliale Zell-ähnliche$r$n Zellen Spezifikationen 1 #215; 10^6cells/T25 Kulturflasche oder 1ml Gefrierrohr Verpackung $r$n Medium RPMI1640 +10% fe

Produktdetails

VMRC-LCD menschliche nicht-kleinzellige Lungenkrebszellen

Grundeigenschaften der Zelle
Name der Zelle	VMRC-LCD menschliche nicht-kleinzellige Lungenkrebszellen
Zellen nicht nennen	VMRC-LCD
Artikelnummer	XY-H1034
Herkunft	Mensch
Alter und Geschlecht	-
Organisationsquellen	Lunge
Wachstumsmerkmale	Wandwachstum
Zellmorm	Epiteliale Zellen
Hintergrundprofil	-
Biosicherheitsklasse	-
Zellen Spezifikationen	1 x 10^6cells/T25 Kulturflasche oder 1ml Gefrierrohrverpackung
Branchenprüfung	Nichts
Kulturmedium	RPMI1640 +10% fetales Rinderserum +1% P/S
Aufbaubedingungen	Gasphase:95%Luft+5%Kohlendioxid; Temperatur:37℃
Gefrierbedingungen	Blutfreie Gefrierflüssigkeit, flüssiger Stickstoff
Zeit verdoppeln	~24-30Stunde

2. Nach der Empfang der ZellenBehandlung

1)Nach dem Empfang der Zellen, 75% Alkohol desinfizierte Flasche Wand T25 Flasche auf Raumtemperatur für etwa 1 Stunde, wenn die Kultur Flasche gebrochen, Flüssigkeit überlaufen und die Zellen kontaminiert, bitte kontaktieren Sie uns sofort, nachdem Sie ein Foto gemacht haben.

2)Bitte bestätigen Sie den Zellstand unter einem 4- oder 5X-Mikroskop und machen Sie gleichzeitig 2-3 Fotos der gerade erhaltenen Zellen (10 x, 20 x) sowie ein Bild des Aussehens der Kulturflasche, um den Zellstand nach dem Verkauf zu ermitteln.

3)Wandzellen:Die Zellen werden 1h bei Raumtemperatur platziert, beobachten Sie unter dem Mikroskop das Wachstum der Zellen und die Situation der Klebstoffzellen, einige Klebstoffzellen werden während des Express-Transports durch Vibrationen abfallen und sich nach dem Abfallen gründen.Wenn die Wachstumsdichte der Zellen unter dem Spiegel betrachtet wird, wenn sie unter 60% liegt, können Sie das Intrusionsmedium aus der Flasche entfernen (wenn keine Zellen, die an der Wand geklebt sind, zentrifugiert werden müssen, in die ursprüngliche Flasche wieder suspendiert werden), die neu zubereitete Pille mit 6-8 ml vollem Medium hinzufügen und in die Zellkultur weiterkultivieren. Wenn die Zellwachstumsdichte über 70-80% beträgt, kann die Zelle übertragen werden. Während der Übertragung müssen Zellen, die aufgrund von Transportvibrationen abgefallen sind, zentrifugiert zurückgewinnt werden.

4)Zelltransport auf dem Weg zu entfernen Betriebsmethode: Entfernte Zellen sammeln nach Zentrifugierung zu entfernen, mit PBS zu reinigen, Zentrifugierung zu entfernen, 1 ml ein Enzym in der Zentrifugierung hinzufügen, um etwa 20 Sekunden zu verdauenPillenAlleNachdem das Medium die Verdauung beendet hat, wird die Zentrifuge wieder ausgelegt, und die übrigen Klebstoffzellen arbeiten nach der normalen Klebstoffzellübertragungsmethode.

5)Hinweis: das Transportmedium (Irrigationsmedium) kann nicht mehr verwendet werden, um Zellen zu kultivieren, bitte ersetzen Sie die neue Formulierung nach den Bedingungen der Anleitung ZellkulturPillenAlleKulturmedium, um Zellen zu kultivieren. Die erste Übertragung nach Empfang der Zellen empfiehlt eine T25-Kultivflasche 1: 2-Übertragung.

Drei,dünnZellkultur Operation

1) Erholungszellen:Die folgende Zellkultur Gefrierbehandlung ist nur zur Referenz, die spezifischen Betriebsschritte sind in der Lieferanwendung vorrangig

wird enthalten1 mlGefrierrohr der Zellsuspension in 37℃ Wasserbad schnell schütteln, auftauen, plus4 mlDas Medium ist gleichmäßig vermischt. in1000 Umdrehungen pro MinuteZentrifuge unter Bedingungen3 MinutenEntfernen Sie die Flüssigkeit und fügen Sie1 bis 2 mlNach dem Kulturmedium gut blasen. Alle Zellsuspensionen werden dann über Nacht in eine Flasche mit einer angemessenen Menge an Medium kultiviert (oder Zellsuspensionen hinzugefügt).4 cmIn den Teller, fügen Sie ungefähr4 mlPillenAlleKulturmedium, über Nacht kultiviert). Am dritten Tag wechseln und die Zelldichte prüfen.

2) Zellenübertragung:Wenn die Zelldichte zwischen 80% und 90% beträgt, kann eine Übertragungskultur durchgeführt werden.

a)Entfernen Sie die Kultur, mit Kalzium- und Magnesium-Ionen freiPBSZellen waschen1-2Zweimal.

b)plus1 mlVerdauungsflüssigkeit (0,25%Trypsin-0,02%EDTAIn der Kultivflasche lassen Sie die Verdauungsflüssigkeit alle Zellen durchdringen und legen Sie die Kultivflasche in37Verdauung in der Kultivationskammer1 - 3 Minuten(abhängig von der Zellverau), dann beobachten Sie die Zellverau unter dem Mikroskop, wenn die Zellen zum größten Teil runden und fallen, schnell wieder auf den Arbeitstisch, klicken Sie auf die Kulturflasche und fügen Sie hinzu2-3 mlPillenAlleDas Kulturmedium beendet die Verdauung.

c)Vorsichtig geschlagen und in sterile Zentrifugerrohre geladen,1000 Umdrehungen pro MinuteZentrifugieren5 MinutenEntfernen Sie die Flüssigkeit und fügen Sie hinzu.1 bis 2 mlNach der Kultivierung gut blasen.

d)Drücken Sie die Zellsuspension1:2Verhältnis zu neuen8 mlDas Medium wird in einer neuen Schale oder Flasche in der Kultivkammer kultiviert.

Aufmerksamkeit der Wandzellen:

lMuss.PBSWaschen Sie es wieder.

lBeobachten Sie die Zellen mehrmals, um die Zeit zu beherrschen, beenden Sie nicht die Verdauung, wenn die Zelle nicht grundlegend abfällt, und blasen Sie sie ab, so dass die Zelle Leichter zu zerstören und zu sterben.

lSchlag nicht immer auf die Zellen.

3) Gefrierte Zellen:Wenn die Zellen gut wachsen, können sie gefriert werden. untenT25 Flaschen zum Beispiel

a)Sammeln von Zellen und Zellkulturflüssigkeiten in sterile Zentrifugerrohre,1000 Umdrehungen pro MinuteZentrifuge unter Bedingungen4 MinutenEntfernen Sie die Flüssigkeit, verwenden SiePBSReinigen, wegwerfen.PBSZellzählung durchführen.

b)Zugabe von seroloser Zellfrierflüssigkeit je nach Zellzahl, um die Zelldichte 1×10^6~1×10^7/ mlVorsichtig mischen und jedes Gefrierrohr einfrieren1 mlZellsuspension, achten Sie darauf, dass das Gefrierrohr gut gekennzeichnet ist.

c)Einfrierrohr in-80℃ Kühlschrank,24 StundenAnschließend in die Flüssigstickstoffspeicherung übertragen. Aufzeichnen Sie die Position des Gefrierrohres für das nächste Mal.

Vier,Aufmerksamkeit fördern

1)Probleme mit den Zellen, wiederkehren

a)Verschiedene Probleme, die während des Zelltransports auftreten, Zellverlust, Flaschenbeschädigung, schwere Leckage von Kulturflüssigkeiten usw.

b)Probleme mit der Zellverkontamination, bitte senden Sie uns die echten Experimentergebnisse innerhalb von 3 Tagen nach Erhalt des Produkts, nachdem sie überprüft wurden;

c)Die überwiegende Mehrheit der Zellen hat nicht überlebt, nach 2 Stunden nach Normaltemperatur-Lieferung der Zellen in der Stillstand, 2 Tage nach der Erholung der Zellen in der Trockeneislagerung, die überwiegende Mehrheit der Zellen hat nicht überlebt, (ein echtes und klares Zellstandsfoto muss bereitgestellt werden), wiedergegeben;

d)Trockeneis gelagert Zellen nach 2 Tagen nach der Erholung der Lieferung oder bei normaler Temperatur die Lieferung der Zellen für 2 Stunden und nicht geöffnet, Verunreinigung, Wiedergabe;

e)Probleme mit der Zellaktivität, bitte senden Sie uns echte Experimentergebnisse innerhalb von 7 Tagen nach Erhalt des Produkts, um die Zellaktivität mit der Taipanblauen Chromatologie zu identifizieren, und tägliche Zellfotos, nachdem sie überprüft wurden, wiederzugeben;

f)Die Zelle am Tag des Empfangs und am 2. und 3. Tag bitte fotografieren, 3 Tage ohne Mitteilung, gilt als Produkt qualifiziert. Wenn ein Problem innerhalb von 4-7 Tagen auftritt, müssen Sie 3 Tage vor dem Empfang des Zellfotos und des Zellproblems sowie detaillierte Schritte für die zellbezogenen Handlungen zur Verfügung stellen und mit dem Techniker kommunizieren, den Techniker für unsere Verantwortung entscheidet, wiedersenden.

2)Probleme mit den Zellen, die sich nicht wiederholen

a)Kundenbetrieb verursacht zelluläre Verschmutzung, keine Wiedergabe;

b)Schwere Betriebsfehler des Kunden verursachen einen schlechten Zustand der Zelle, keine Wiedergabe;

c)Nicht empfohlene Zellkultur-System verursacht schlechten Zellzustand, keine Wiedergabe;

d)Schlechter Zellzustand, keine echte klare Zellstandsfoto vor 3 Tagen der Kultur, keine Wiedergabe;

e)Zellkultur nach anderen Behandlungen verursacht Zellprobleme, keine Wiederholung;

f)Empfang der Zellen und die Erkenntnis von Problemen mit dem Kundendienstpersonal, die sich als länger als 7 Tage nachweisen, nicht wiedersenden;

g)Je nach Umstand

V. Hinweise

1. Alle tierischen Zellen werden als potenziell biologisch gefährlich angesehen und müssen in einem Biosicherheitsstand der zweiten Stufe betrieben werden. Bitte achten Sie darauf, dass alle Abfälle und Gefäße, die mit dieser Zelle in Berührung gekommen sind, sterilisiert werden müssen, bevor sie entsorgt werden können.

2. Es wird empfohlen, bei der Erholung gefrorener Zellen immer Schutzhandschuhe, Kleidung und Schutzmasken zu tragen. Hinweis: Ein Gefrierrohr, das in flüssigen Stickstoff eingetaucht ist, leckt und wird langsam mit flüssigem Stickstoff gefüllt. Wenn flüssiger Stickstoff in eine Gasphase umgewandelt wird, kann der Behälter explodieren oder seinen Deckel mit gefährlicher Kraft abblasen, wodurch fliegendes Schutt verursacht wird, das Menschen verletzt.

3. Diese Zelle dient ausschließlich der Wissenschaft. Die Anleitung ist nur zur Information und gilt als tatsächliche Anleitung!

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