F81 (Katzennierenzellen)

F81 (Katzennierenzellen)

Eigenschaften der Ware

Produktvorstellung

Gattung Hauskatze

Alter (Geschlecht) Unbekannt

Organisationsquellen Unbekannt

Wachstumsmerkmale Wandzellen

Zellmorm Epiteliale Zellen

Biosicherheitsklasse 1

Wachstumsmedium RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P / S

Empfohlenes Übertragungsverhältnis 1:2-1:4

Empfohlene Wechselfrequenz 2-3 Mal / Woche

Gefrierbedingungen

Gefrierflüssigkeit:55% Basismedium + 40% FBS + 5% DMSO

Temperatur: Flüssiger Stickstoff

Aufbaubedingungen

Gas: Luft,95%； CO2, 5 Prozent

Temperatur:37℃

Zellbehandlung:

1) Erholung der gefrorenen Zellen:

Das Gefrierrohr mit 1 ml Zellsuspension wird in einem 37 ° C Wasserbad schnell geschüttelt und in ein Zentrifugerrohr mit 4-6 ml Medium gleichmäßig vermischt. Zentrifugieren Sie 3-5min unter 1000 RPM, entfernen Sie die Oberflüssigkeit und suspendieren Sie die Zellen im Kulturmedium. Die Zellsuspension wird dann über Nacht in eine Kulturflasche (oder Schalen) mit 6-8 ml Medium bei 37 ° C kultiviert. Am nächsten Tag wird das Zellwachstum und die Zelldichte unter dem Mikroskop beobachtet.

2) Zelltransplantation: Wenn die Zelldichte 80% -90% beträgt, kann eine Zelltransplantation durchgeführt werden.

Für die klebende Zelltransmission kann man sich auf die folgenden Methoden beziehen:

1. Entfernen Sie die Kultur und waschen Sie die Zellen 1-2 mal mit PBS ohne Kalzium- und Magnesiumionen.

2. 0,25% (w / v) -0,53 mM EDTA in die Flasche (T25 Flasche 1-2 mL, T75 Flasche 2-3 mL) hinzufügen, in einem 37 ° C-Gehäuse für 1-2 Minuten verdauen (schwer verdaubare Zellen können die Verdauungszeit angemessen verlängern), dann beobachten Sie die Zellverauung unter dem Mikroskop, wenn die Zellen sich größtenteils runden und ausfallen, nehmen Sie schnell den Arbeitstisch zurück, klicken Sie auf die Flasche und fügen Sie 3-4 ml des Mediums hinzu, das 10% FBS enthält, um die Verdauung zu beenden.

3. nach sanftem Schlagen aussaugen, 3-5 min unter 1000 RPM zentrifugieren, die Oberflüssigkeit entfernen und 1-2 ml Kulturflüssigkeit hinzufügen. Die Zellsuspension wird im Verhältnis von 1: 2 in eine neue T25-Flasche aufgeteilt, 6-8 ml eines neuen Mediums hinzugefügt, das gemäß den Anforderungen der Anleitung konfiguriert ist, um das Wachstum der Zellen zu erhalten, und die nachfolgende Übertragung erfolgt im Verhältnis von 1: 2 bis 1: 5 je nach den tatsächlichen Umständen.

3) Zellfrieren: Nach Erhalt der Zellen wird empfohlen, eine Reihe von Zellsamen für die nachfolgenden Experimente bei der Kultivierung der ersten 3 Generationen einzufrieren.

Schritte zur Zelltransplantation:

(1) Die Übertragung erfolgt, wenn die Zellmorm und die Wachstumsdichte unter dem Mikroskop 90% erreichen.

(2) Entfernung der Kulturflüssigkeit. Fügen Sie PBS 1-2 Mal reinigen und schütteln Sie nach dem Entfernen.

(3) Fügen Sie den Boden der Flasche zu und enthalten EDTA.

(4) Kulturflasche in 37 ° C Kulturkammer zur Verdauung, etwa 3 min herausgenommen, mit dem Mikroskop beobachten, ob die Menge der Zellen mehr als 80% ist, die Kontraktion und die Kreuzung auftreten, die Zellspalt wird größer. Vorsichtig schlagen Sie die Kulturflasche, so dass die restlichen Zellen abfallen, fügen Sie eine doppelte Menge der Verdauung zu unterbrechen und blasen gleichmäßig, um eine Überverdauung zu vermeiden.

(5) Zellsuspension in das Zentrifugerrohr, 1000 rpm / min 3 ~ 5min zentrifugieren.

(6) Absorbieren Sie das Oberwasser, fügen Sie die Kulturflüssigkeit hinzu, um die Zellen wieder zu suspendieren und die Zellen gleichmäßig zu verteilen.

(7) Absorbieren Sie die Zellsuspension, wählen Sie die geeignete Dichte für die Impfung in eine neue Kulturflasche, ergänzen Sie die Kulturflüssigkeit und schütteln Sie gut und legen Sie eine CO2-Kultivkammer bei 37 ° C zur Kultivierung.

(8) Bestimmung der Wechsel- oder Übertragungszeit basierend auf dem Zellwachstumszustand.

9) Zellfrieren

Produkte, die das Unternehmen verkauft:

Tumorprotein bei Rattenp53 (TP53) Testkit, englischer Name: TP53 ELISA Kit

Mouse soluble cell differeiation aigen 30 (sCD30) ELISA Kit

MouseE-SelectinELISAkit Maus E-Selectin (E-Selectin/CD62E) Testkit 96T/48T Importpaket

CLIAKitforHumanIg-ähnliche Rezeptoren, ILTsRELISAKit-ähnliche Transkriptoren

miniRNA-Bibliothekdatenbank (im Aufbau) Mitgliedschaft

ELISAKitADAM8 Rattenlysate integrierte Metallproteinase 8

Carboxypeptidase A2 / CPA2 Protein

Endokrine Drüsen Quelle Blutgefäße Endotel Wachstumsfaktoren(EG-VEGF) 重组蛋白 Rekombinanter endokriner Drüsengeleiteter vaskulärer endothelialer Wachstumsfaktor (EG-VEGF)

Her4 / ErbB4 Protein

CSNK1G1 Protein Human recombinant CSNK1G1 / CKI-gamma 1 Protein (His & GST-Tag)

NA Protein H1N1 Neuraminidase / NA (N295S Mutation) (hohe Aktivität)

Endokrine Drüsen Quelle Blutgefäße Endotel Wachstumsfaktoren(EG-VEGF) 重组蛋白 Rekombinanter endokriner Drüsengeleiteter vaskulärer endothelialer Wachstumsfaktor (EG-VEGF)

CSNK1G1 Protein Human recombinant CSNK1G1 / CKI-gamma 1 Protein (His & GST-Tag)

Carboxypeptidase A2 / CPA2 Protein

NA Protein H1N1 Neuraminidase / NA (N295S Mutation) (hohe Aktivität)

Her4 / ErbB4 Protein

F81 (Katzennierenzellen)Mäuse RezeptorenELISA-Kit 96T/48T

Humaner Koagulationsfaktor XIII (F XIII) ELISA Kit

Humananspoerassociatedwithaigenprocessing, TAPELISAKit Test Kit für humane Antigenverarbeitung mit Transportproteinen (TAP) 96T/48T

Human2,3-DinochromboxaneB2,2,3-Dinor-TXB2-Testkit Spezifikationen für Human2,3-Dinor-Thrombotan B2 (2,3-Dinor-TXB2) Testkit: 96T/48T

Pilze/ Hefe Zell Probe Oxidase Aktivität Testkit 20 Mal

Mouseapoprotein, apo-A1ELISAKit Mouse Carrier Protein A1 (apo-A1) Test Kit Spezifikationen: 96T/48T

Lösliches weißes Blutkörperchen-Differenzierungsantigen bei Mäusen86(B7-2/sCD86) Testkit 96T/48T Testkit Montage/Original

Lösliches weißes Blutkörperchen-Differenzierungsantigen bei Mäusen40-Ligand-Testkit (sCD40L) 96T/48T-Kit Montage/Original

Lösliches weißes Blutkörperchen-Differenzierungsantigen bei Mäusen30-Ligand-Testkit (sCD30L) 96T/48T-Kit Montage/Original

Lösliches weißes Blutkörperchen-Differenzierungsantigen bei Mäusen30(sCD30) Testkits 96T/48T Kits Montage/Original

Behandlung nach Empfang der Zellen:

1) Nach dem Empfang der Zellen, 75% Alkohol desinfizierte Flasche Wand T25 Flasche in 37 ° C Kulturkammer für ca. 2-3 h platziert, wenn die Kulturflasche gebrochen, Flüssigkeit überlaufen und die Zellen kontaminiert sind, bitte kontaktieren Sie uns rechtzeitig, nachdem Sie ein Foto gemacht haben.

2) Bitte bestätigen Sie den Zellstand unter dem 4- oder 5X-Mikroskop und machen Sie gleichzeitig 2-3 Fotos der gerade empfangenen Zellen (10 x, 20 x) und ein Bild des Aussehens der Kulturflasche, um den Zellstand nach dem Verkauf zu erhalten.

3) Klebstoffzellen: Die Zellen werden 2-3 h in einem 37 ° C-Kulturraum platziert, beobachten Sie das Wachstum der Zellen und den Klebstoffzustand unter dem Mikroskop, einige Klebstoffzellen fallen während des Express-Transports aufgrund der Vibration ab und nach dem Abfall der Gruppierung. Wenn die Wachstumsdichte der Zellen unter dem Spiegel betrachtet wird, wenn sie unter 60% liegt, können Sie das Intrusionsmedium aus der Flasche entfernen (wenn keine Zellen, die an der Wand geklebt sind, zentrifugiert werden müssen, in die ursprüngliche Flasche wieder suspendiert werden), das neu zusammengesetzte Medium 6-8 ml hinzufügen und in die Zellkultur weiterkultivieren. Wenn die Zellwachstumsdichte über 70-80% beträgt, kann die Zelle übertragen werden. Während der Übertragung müssen Zellen, die aufgrund von Transportvibrationen abgefallen sind, zentrifugiert zurückgewinnt werden.