SUP-M2 Interdegenerate Großzellen-Lymphozyten

SUP-M2 Interdegenerate Großzellen-Lymphozyten

Eigenschaften der Ware

Produktvorstellung

Herkunft: Mensch

Geschlecht: Frauen,5Alter

Wachstumsmerkmale: Suspendiert

Zellmorma: Lymphozytenartig

Spezifikationen der Zellen:1 x 106 Zellen/T25oder1 mlGefrierrohr

Aufbaubedingungen:80-90% RPMI 1640 + 10-20% h.i. FBS37℃5 % CO2

Gefrierbedingungen:90 % FBS + 10 % DMSO

Übertragungsmethode:1:2Übertragung, 2-3Geschichte1Generation

Zellbehandlung:

1) Erholung der gefrorenen Zellen:

Das Gefrierrohr mit 1 ml Zellsuspension wird in einem 37 ° C Wasserbad schnell geschüttelt und in ein Zentrifugerrohr mit 4-6 ml Medium gleichmäßig vermischt. Zentrifugieren Sie 3-5min unter 1000 RPM, entfernen Sie die Oberflüssigkeit und suspendieren Sie die Zellen im Medium. Die Zellsuspension wird dann über Nacht in eine Kulturflasche (oder Schalen) mit 6-8 ml Medium bei 37 ° C kultiviert. Am nächsten Tag wird das Zellwachstum und die Zelldichte unter dem Mikroskop beobachtet.

2) Zelltransplantation: Wenn die Zelldichte 80% -90% beträgt, kann eine Zelltransplantation durchgeführt werden.

Für die klebende Zelltransmission kann man sich auf die folgenden Methoden beziehen:

1. Entfernen Sie die Kultur und waschen Sie die Zellen 1-2 mal mit PBS ohne Kalzium- und Magnesiumionen.

2. 0,25% (w / v) -0,53 mM EDTA in die Flasche (T25 Flasche 1-2 mL, T75 Flasche 2-3 mL) hinzufügen, in einem 37 ° C-Gehäuse für 1-2 Minuten verdauen (schwer verdaubare Zellen können die Verdauungszeit angemessen verlängern), dann beobachten Sie die Zellverauung unter dem Mikroskop, wenn die Zellen sich größtenteils runden und ausfallen, nehmen Sie schnell den Arbeitstisch zurück, klicken Sie auf die Flasche und fügen Sie 3-4 ml des Mediums hinzu, das 10% FBS enthält, um die Verdauung zu beenden.

3. nach sanftem Schlagen aussaugen, 3-5 min unter 1000 RPM zentrifugieren, die Oberflüssigkeit entfernen und 1-2 ml Kulturflüssigkeit hinzufügen. Die Zellsuspension wird im Verhältnis von 1: 2 in eine neue T25-Flasche aufgeteilt, 6-8 ml eines neuen Mediums hinzugefügt, das gemäß den Anforderungen der Anleitung konfiguriert ist, um das Wachstum der Zellen zu erhalten, und die nachfolgende Übertragung erfolgt im Verhältnis von 1: 2 bis 1: 5 je nach den tatsächlichen Umständen.

3) Zellfrieren: Nach Erhalt der Zellen wird empfohlen, eine Reihe von Zellsamen für die nachfolgenden Experimente bei der Kultivierung der ersten 3 Generationen einzufrieren.

Schritte zur Zelltransplantation:

(1) Die Übertragung erfolgt, wenn die Zellmorm und die Wachstumsdichte unter dem Mikroskop 90% erreichen.

(2) Entfernung der Kulturflüssigkeit. Fügen Sie PBS 1-2 Mal reinigen und schütteln Sie nach dem Entfernen.

(3) Fügen Sie den Boden der Flasche zu und enthalten EDTA.

(4) Kulturflasche in 37 ° C Kulturkammer zur Verdauung, etwa 3 min herausgenommen, mit dem Mikroskop beobachten, ob die Menge der Zellen mehr als 80% ist, die Kontraktion und die Kreuzung auftreten, die Zellspalt wird größer. Vorsichtig schlagen Sie die Kulturflasche, so dass die restlichen Zellen abfallen, fügen Sie eine doppelte Menge der Verdauung zu unterbrechen und blasen gleichmäßig, um eine Überverdauung zu vermeiden.

(5) Zellsuspension in das Zentrifugerrohr, 1000 rpm / min 3 ~ 5min zentrifugieren.

(6) Absorbieren Sie das Oberwasser, fügen Sie die Kulturflüssigkeit hinzu, um die Zellen wieder zu suspendieren und die Zellen gleichmäßig zu verteilen.

(7) Absorbieren Sie die Zellsuspension, wählen Sie die geeignete Dichte für die Impfung in eine neue Kulturflasche, ergänzen Sie die Kulturflüssigkeit und schütteln Sie gut und legen Sie eine CO2-Kultivkammer bei 37 ° C zur Kultivierung.

(8) Bestimmung der Wechsel- oder Übertragungszeit basierend auf dem Zellwachstumszustand.

9) Zellfrieren

Produkte, die das Unternehmen verkauft:

Transaminase im Winter(AST)Rekombiniertes ProteinRekombinante Aspartat-Aminotransferase (AST)

CPM Protein MenschUmstrukturierenCarboxypeptidase M / CPMProtein

MCAMUmstrukturierenCD146 / MCAMProteinFcEtikett(Protein)

HA-Protein H5N2Restrukturieren Sie Grippe AH5N2 (A/American Green-winged Teal/California/HKWF609/07)BlutglötenHA1 (Hämagglutinin)Protein

PEBP1UmstrukturierenPEBP1 / Phosphatidylethanolamin bindendes Protein 1ProteinProtein

MCAMUmstrukturierenCD146 / MCAMProteinFcEtikett(Protein)

Transaminase im Winter(AST)Rekombiniertes ProteinRekombinante Aspartat-Aminotransferase (AST)

PEBP1UmstrukturierenPEBP1 / Phosphatidylethanolamin bindendes Protein 1ProteinProtein

CPM Protein MenschUmstrukturierenCarboxypeptidase M / CPMProtein

HA-Protein H5N2Restrukturieren Sie Grippe AH5N2 (A/American Green-winged Teal/California/HKWF609/07)BlutglötenHA1 (Hämagglutinin)Protein

Maus Hitzeschock Protein90(HSP-90)ELISAReagenzkist96T / 48T

Human mucosal addressin cell adhesion molecule (MAdCAM-1) ELISA KitHuman Schleimhaut Addressin Zellhaftmoleküle(MAdCAM-1)Testkits

Humancytokeratin Low MolecularWeight, CK-LMWELISAKitMenschliches Low Molecular Weight Cell Keratin(CK-LMW)Testkits96T / 48TImportaufteilung

Guineschweinerleukin4, IL-4Detektion Kit Schwein Interfin4(IL-4)Spezifikationen des Testkits:96T / 48T

Pilze/Hefe-Zellen β-Quantitative Testkits für Semilactosidase-aktive chemische Luminescenz20Nächster

Maus Carbohydrase 2,CA-2ELISAKitMäusenzyme2(CA-2)Spezifikationen des Testkits:96T / 48T

SUP-M2Interdegenerate großzellige LymphozytenEndothelische Synthesase von Mäusen(eNOS)Testkits 96T / 48T Reagenzkist montieren/Original

Mäuse Endopix1(ET-1)Testkits 96T / 48T Reagenzkist montieren/Original

Blutgefässige endoteliale Wachstumsfaktoren von endokrinen Drüsen in Mäusen(EG-VEGF)Testkits 96T / 48T Reagenzkist montieren/Original

Giftstoffe in Mäusen(ET)Testkits 96T / 48T Reagenzkist montieren/Original

Ratten Salz Kortikorrezeptoren(Herr)Testkit, englischer Name:MR ELISA Kit

Maus Thrombin Aththrombin Komplex (TAT) ELISA KitAnti-Komplexe für Mäuse(TAT)Testkits

MauseEndokrinellendvaskulärerendothelialgewachstumsfaktor, EG-VEGFELISAKitBlutgefässige endoteliale Wachstumsfaktoren von endokrinen Drüsen in Mäusen(EG-VEGF)Testkits96T / 48TImportaufteilung

CLIAKitforHumanKomplexfragme3a,C3aELISAKitMenschliche Ergänzung3a

ZellenCASEINKINASE1Quantitative Testkits für δ-Kinase-Aktivität(A/B/C)20Nächster

ELISAKitOFQ/NRatte Orphan Peptide

Behandlung nach Empfang der Zellen:

1) Nach dem Empfang der Zellen, 75% Alkohol desinfizierte Flasche Wand T25 Flasche in 37 ° C Kulturkammer für ca. 2-3 h platziert, wenn die Kulturflasche gebrochen, Flüssigkeit überlaufen und die Zellen kontaminiert sind, bitte kontaktieren Sie uns rechtzeitig, nachdem Sie ein Foto gemacht haben.

2) Bitte bestätigen Sie den Zellstand unter dem 4- oder 5X-Mikroskop und machen Sie gleichzeitig 2-3 Fotos der gerade empfangenen Zellen (10 x, 20 x) und ein Bild des Aussehens der Kulturflasche, um den Zellstand nach dem Verkauf zu erhalten.

3) Klebstoffzellen: Die Zellen werden 2-3 h in einem 37 ° C-Kulturraum platziert, beobachten Sie das Wachstum der Zellen und den Klebstoffzustand unter dem Mikroskop, einige Klebstoffzellen fallen während des Express-Transports aufgrund der Vibration ab und nach dem Abfall der Gruppierung. Wenn die Wachstumsdichte der Zellen unter dem Spiegel betrachtet wird, wenn sie unter 60% liegt, können Sie das Intrusionsmedium aus der Flasche entfernen (wenn keine Zellen, die an der Wand geklebt sind, zentrifugiert werden müssen, in die ursprüngliche Flasche wieder suspendiert werden), das neu zusammengesetzte Medium 6-8 ml hinzufügen und in die Zellkultur weiterkultivieren. Wenn die Zellwachstumsdichte über 70-80% beträgt, kann die Zelle übertragen werden. Während der Übertragung müssen Zellen, die aufgrund von Transportvibrationen abgefallen sind, zentrifugiert zurückgewinnt werden.