RK-13 (Kaninchen-Nierenzelllinie)

Zellbehandlung:

1) Erholung der gefrorenen Zellen:

Das Gefrierrohr mit 1 ml Zellsuspension wird in einem 37 ° C Wasserbad schnell geschüttelt und in ein Zentrifugerrohr mit 4-6 ml Medium gleichmäßig vermischt. Zentrifugieren Sie 3-5min unter 1000 RPM, entfernen Sie die Oberflüssigkeit und suspendieren Sie die Zellen im Medium. Die Zellsuspension wird dann über Nacht in eine Kulturflasche (oder Schalen) mit 6-8 ml Medium bei 37 ° C kultiviert. Am nächsten Tag wird das Zellwachstum und die Zelldichte unter dem Mikroskop beobachtet.

2) Zelltransplantation: Wenn die Zelldichte 80% -90% beträgt, kann eine Zelltransplantation durchgeführt werden.

Für die klebende Zelltransmission kann man sich auf die folgenden Methoden beziehen:

1. Entfernen Sie die Kultur und waschen Sie die Zellen 1-2 mal mit PBS ohne Kalzium- und Magnesiumionen.

2. 0,25% (w / v) -0,53 mM EDTA in die Flasche (T25 Flasche 1-2 mL, T75 Flasche 2-3 mL) hinzufügen, in einem 37 ° C-Gehäuse für 1-2 Minuten verdauen (schwer verdaubare Zellen können die Verdauungszeit angemessen verlängern), dann beobachten Sie die Zellverauung unter dem Mikroskop, wenn die Zellen sich größtenteils runden und ausfallen, nehmen Sie schnell den Arbeitstisch zurück, klicken Sie auf die Flasche und fügen Sie 3-4 ml des Mediums hinzu, das 10% FBS enthält, um die Verdauung zu beenden.

3. nach sanftem Schlagen aussaugen, 3-5 min unter 1000 RPM zentrifugieren, die Oberflüssigkeit entfernen und 1-2 ml Kulturflüssigkeit hinzufügen. Die Zellsuspension wird im Verhältnis von 1: 2 in eine neue T25-Flasche aufgeteilt, 6-8 ml eines neuen Mediums hinzugefügt, das gemäß den Anforderungen der Anleitung konfiguriert ist, um das Wachstum der Zellen zu erhalten, und die nachfolgende Übertragung erfolgt im Verhältnis von 1: 2 bis 1: 5 je nach den tatsächlichen Umständen.

3) Zellfrieren: Nach Erhalt der Zellen wird empfohlen, eine Reihe von Zellsamen für die nachfolgenden Experimente bei der Kultivierung der ersten 3 Generationen einzufrieren.

RK-13 (Kaninchen-Nierenzelllinie)

Eigenschaften der Ware

Produktvorstellung

Alter (Geschlecht) 5 Wochen alt

Organisationsquellen Nieren

Wachstumsmerkmale Wandzellen

Zellmorm Epiteliale Zellen

Biosicherheitsklasse 2

Wachstumsmedium MEM + 10% FBS + 1% P / S

Empfohlenes Übertragungsverhältnis 1:2-1:4

Empfohlene Wechselfrequenz 2-3 Mal / Woche

Gefrierbedingungen

Gefrierflüssigkeit:55% Basismedium + 40% FBS + 5% DMSO

Temperatur: Flüssiger Stickstoff

Aufbaubedingungen

Gas: Luft,95%； CO2, 5 Prozent

Temperatur:37℃

Schritte zur Zelltransplantation:

(1) Die Übertragung erfolgt, wenn die Zellmorm und die Wachstumsdichte unter dem Mikroskop 90% erreichen.

(2) Entfernung der Kulturflüssigkeit. Fügen Sie PBS 1-2 Mal reinigen und schütteln Sie nach dem Entfernen.

(3) Fügen Sie den Boden der Flasche zu und enthalten EDTA.

(4) Kulturflasche in 37 ° C Kulturkammer zur Verdauung, etwa 3 min herausgenommen, mit dem Mikroskop beobachten, ob die Menge der Zellen mehr als 80% ist, die Kontraktion und die Kreuzung auftreten, die Zellspalt wird größer. Vorsichtig schlagen Sie die Kulturflasche, so dass die restlichen Zellen abfallen, fügen Sie eine doppelte Menge der Verdauung zu unterbrechen und blasen gleichmäßig, um eine Überverdauung zu vermeiden.

(5) Zellsuspension in das Zentrifugerrohr, 1000 rpm / min 3 ~ 5min zentrifugieren.

(6) Absorbieren Sie das Oberwasser, fügen Sie die Kulturflüssigkeit hinzu, um die Zellen wieder zu suspendieren und die Zellen gleichmäßig zu verteilen.

(7) Absorbieren Sie die Zellsuspension, wählen Sie die geeignete Dichte für die Impfung in eine neue Kulturflasche, ergänzen Sie die Kulturflüssigkeit und schütteln Sie gut und legen Sie eine CO2-Kultivkammer bei 37 ° C zur Kultivierung.

(8) Bestimmung der Wechsel- oder Übertragungszeit basierend auf dem Zellwachstumszustand.

9) Zellfrieren

Behandlung nach Empfang der Zellen:

1) Nach dem Empfang der Zellen, 75% Alkohol desinfizierte Flasche Wand T25 Flasche in 37 ° C Kulturkammer für ca. 2-3 h platziert, wenn die Kulturflasche gebrochen, Flüssigkeit überlaufen und die Zellen kontaminiert sind, bitte kontaktieren Sie uns rechtzeitig, nachdem Sie ein Foto gemacht haben.

2) Bitte bestätigen Sie den Zellstand unter dem 4- oder 5X-Mikroskop und machen Sie gleichzeitig 2-3 Fotos der gerade empfangenen Zellen (10 x, 20 x) und ein Bild des Aussehens der Kulturflasche, um den Zellstand nach dem Verkauf zu erhalten.

3) Klebstoffzellen: Die Zellen werden 2-3 h in einem 37 ° C-Kulturraum platziert, beobachten Sie das Wachstum der Zellen und den Klebstoffzustand unter dem Mikroskop, einige Klebstoffzellen fallen während des Express-Transports aufgrund der Vibration ab und nach dem Abfall der Gruppierung. Wenn die Wachstumsdichte der Zellen unter dem Spiegel betrachtet wird, wenn sie unter 60% liegt, können Sie das Intrusionsmedium aus der Flasche entfernen (wenn keine Zellen, die an der Wand geklebt sind, zentrifugiert werden müssen, in die ursprüngliche Flasche wieder suspendiert werden), das neu zusammengesetzte Medium 6-8 ml hinzufügen und in die Zellkultur weiterkultivieren. Wenn die Zellwachstumsdichte über 70-80% beträgt, kann die Zelle übertragen werden. Während der Übertragung müssen Zellen, die aufgrund von Transportvibrationen abgefallen sind, zentrifugiert zurückgewinnt werden.

Produkte, die das Unternehmen verkauft:

Ratten Tribladfaktor2 (TFF2) Testkit, englischer Name: TFF2 ELISA Kit

Maussignalanleitungsmolekül 7 (Smad7) ELISA Kit

Ratcarbonicanhydrase, CAELISAKit Rattenenzym (CA) Testkit 96T/48T Import

CLIAKitforHAase (Humane Hyaluronidase) ELISAKit

Zellradioproteinase-8(CASPASE-8) Quantitatives Testkit für 20-mal aktive Vergleichsfärbung

Rat Vascuolar Cell Adhesion Molecule1, VCAM-1ELISAKit Ratte Blutgefäße Endotelzellen Adhesion Molecule 1 (VCAM-1 / CD106) Test Kit Spezifikationen: 96T / 48T

Frizzled-10 / FZD10 Protein (Fc-Tag) (Fc-Tag) Protein

Angiotensin II Rezeptor (Ang II 0,5 mg Angiotensin II Rezeptor (Ang II)) Angiotensin II Rezeptor (Antigen)

TEK-Rekombinator Tie2 / CD202b / TEK-Protein (His & GST-Etikett) Protein

CSNK1G2 Human recombinant CSNK1G2 Protein

IL20RB Protein Rat (Fc-Tag)

Blastinase-InhibitorenDas rekombinante Cystatin 3 (CST3)

CSNK1G2 Human recombinant CSNK1G2 Protein

Cystatin E / CST6 Protein

KLRC1 Protein Cynomolgus NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 Protein (Fc-Tag)

CSNK2A2 / CK2A2 Protein

RK-13 (Kaninchen Nierenzelllinie)Anti-Komplexe für Mäuse(TAT)ELISA-Kit 96T/48T

Rat Parathyroid Hormone (PTH) ELISA Kit

HumanGlucoseanspoer1, GL1ELISAKit Humanes Glukosetransportprotein 1 (GL1) Testkit 96T/48T Importpaket

Human2,3-Disphosphoglycerat, 2,3-DPG-Test-Kit Spezifikationen für die menschliche 2,3-Diphosphaglycerinsäure (2,3-DPG) Test-Kit: 96T / 48T

Pilze/ Hefe Zellen GesamtRNA-Isolierung Kit 20 Mal

MouseapoproteinB100, apo-B100ELISAKit Mouse Loading Protein B100 (apo-B100) Testkit Spezifikationen: 96T/48T

Löslichkeit bei MäusenP-Selectin (Maus sP-Selectin/sCD62P) Wirkung: ELISA Spezifikation: Import-Partition

MäuseMaussubstanz P Wirkung: ELISA Spezifikation: Importaufteilung

Mäuse Oxylactin(Maus PRL) Rolle: ELISA Spezifikation: Import

Mäuse schwanger(Mouse PROG) Funktion: ELISA Spezifikationen: Import